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目的观察补益营卫方对人皮肤成纤维细胞（HSF）活力的影响作用；观察不同浓度补益营卫方含药血清对人皮肤成纤维细胞（HSF）所具有的延缓衰老作用；探讨其可能的作用机制。方法1细胞培养：从昆明细胞库购得健康人皮肤成纤维细胞，传代接种于培养瓶中，并进行40代的传代，使其成为老化细胞。2含药血清的制备：雄性清洁级SD大鼠60只,体重在300±50g,随机分为补益营卫低剂量组、补益营卫中剂量组和补益营卫高剂量组，各给药组依次按照1.5g∕Kg、3g∕Kg、6g∕Kg灌胃，每日两次，连续一周，第8天末次给药1小时后，10%水合氯醛腹腔注射麻醉，无菌操作心脏采血，室温静置2小时，2500rpm离心15分钟，取出血清，超净台无菌过滤，56℃灭活30分钟，-80℃冰箱中保存备用即为药物血清，分别为补益营卫低剂量组血清、补益营卫中剂量组血清、补益营卫高剂量组血清。用时以DMEM培养基将血清稀释为10％的培养液。3补益营卫方的制备：补益营卫方由人参、生黄芪、炙甘草组成。浓度单位（g生药/ml），终浓度为4g/ml。4细胞生长曲线测定：细胞消化成单细胞悬液后，调整细胞浓度至2.5×10~4/ml，接种于24孔培养板中。待细胞贴壁后，药物处理。每天每组取3孔细胞，用细胞计数板进行计数，计算平均值。每3天给未计数的细胞换液。连续计数8天，以细胞培养天数为横轴，细胞数为纵轴，绘制细胞增殖生长曲线。5细胞增殖活性的检测：用MTT法检测各实验组细胞的增殖活性。6p38、JNK和ERK1/2蛋白免疫细胞化学检测：将细胞用0.25％胰蛋白酶消化。制成单细胞悬液。以5×10~4个/孔的密度接种于预先放有消毒盖玻片的6孔培养板内，置于37℃、5%CO2孵箱中孵育24h后，0.01mmol∕L的PBS洗2次。加入适当固定剂固定细胞以检测药物血清对p38、JNK和ERK1/2等表达的影响。实验设立阴性对照，不加一抗。结果1补益营卫方含药血清对HSF的生长具有促进作用。并能有效延缓HSF的衰老进程。补益营卫低剂量组、补益营卫中剂量组、补益营卫高剂量组与年轻对照组和老龄对照组相比均P <0.05。2不同浓度的补益营卫方含药血清均能增加HSF的增殖活性，与两个对照组相比均有显著性差异（P <0.05）；不同浓度的补益营卫含药血清组之间对HSF的延缓衰老作用是：高剂量组优于中剂量组，中剂量组优于低剂量组。(P<0.05)。结论不同浓度的补益营卫含药血清对HSF均有延缓衰老的作用，且补益营卫高剂量组含药血清的延缓衰老作用优于补益营卫中剂量组含药血清；补益营卫中剂量组含药血清的延缓皮肤衰老作用优于补益营卫低剂量组含药血清。