棉花Ac/Ds转座群体获得及突变体筛选鉴定

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棉花作为国民生产中重要的经济作物,在农业生产中长期占有重要地位,是最重要的天然纤维和纺织原料来源。棉花产量直接影响国民生活的方方面面,但是棉花生产长期受到干旱、盐碱、病虫害等生物与非生物因素的影响。我国一直把棉花作为一种重要的战略物资长期储备。正因为棉花的重要性,棉花生物学研究也逐渐成为当今生命科学领域炙手可热的研究课题之一。棉花作为双子叶作物的模式生物,其全基因组测序工作现已基本完成。这将极大促进棉花生物学研究进程。本研究利用玉米转座子Ac/Ds双元表达系统,通过遗传转化分别获得转Ac和转Ds棉花植株,并通过自交分离得到转基因纯合体。然后将Ac、Ds植株杂交,从后代中筛选发生转座突变的突变体植株。  本研究主要内容包括:⑴通过不同培养基的使用和不同激素(IAA、2,4-D、KT)浓度的改变,成功由coker310下胚轴培养得到胚性愈伤。⑵用农杆菌侵染胚性愈伤,实现棉花遗传转化,成功获得转Ac/Ds植株8株,其中转Ac植株3株,转Ds植株5株。⑶用花粉管通道法进行棉花遗传转化,成功获得转 Ac/Ds株系53个。其中 Ac株系27个,纯合14个;Ds株系26个纯合7个。⑷通过相同品种转Ac和转Ds纯合株系之间杂交获得F1代,并用PPT筛选F1代幼苗得到潜在突变体发生源系178株。在此基础上探索了F2代筛选Ds转座突变体的方法。
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