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原因不明习惯性流产(recurrent spontaneous abortion，RSA)是指排除了所有已知引起流产原因、连续3次或3次以上的反复早期（怀孕20周内）流产，是常见的病理妊娠之一。生殖免疫学研究认为，胚胎的植入是一种半同种异体移植，这与蜕膜组织中正常的免疫微环境有着一定的关系，当移植物被排斥时就会导致流产的发生。引起RSA的病因复杂，除了染色体异常、内生殖器官解剖的异常、感染性疾病以及环境因素外，仍有超过50％的患者病因不明。近年来，母体胎盘界面上人类自然杀伤细胞(Natural killer cell，NK cell)尤为引人注目。NK细胞在机体的免疫调控中发挥了重要的作用，NK细胞功能的异常与RSA的关系密切。国内外研究表明，Th1/Th2型细胞因子表达的失衡也与多种疾病的发生、发展密切相关，尤其在RSA中表达的异常成为了研究的热点。 目的:本研究通过观察RSA患者外周血和蜕膜组织中NK细胞表面抗原标志CD56和CD25的含量变化及其相关性，同时测定RSA患者外周血、蜕膜组织和绒毛组织中TNF-α和TGF-β的水平，以期探讨RSA的免疫学防病机制，为RSA的防治策略提供理论依据。 方法:以60例RSA患者为研究对象，70例要求人工流产的正常妇作为对照，所有病例均于门诊就诊时抽取外周静脉血。本研究通过流式细胞术和免疫荧光技术检测RSA妊娠患者和正常妊娠妇女外周血及蜕膜组织中CD56、CD25的表达水平;应用酶联免疫吸附法(Enzyme-linkedimmunosorbent assay，ELISA)检测RSA妊娠患者和正常妊娠妇女外周血中TNF-α、TGF-β的表达;应用免疫组织化学法检测RSA妊娠患者和正常妊娠妇女蜕膜组织及绒毛组织中TNF-α、TGF-β的表达。 结果: 1.CD56bright、CD25 bright NK细胞在RSA妊娠组患者和正常妊娠组外周血中的含量:流式细胞术检测的结果显示，RSA妊娠组患者外周静脉血中CD56bright、CD25 bright NK细胞的数量显著高于正常妊娠组妇女，其差异有统计学意义（均P＜0.05）。 2.CD56bright、CD25 bright NK细胞在RSA妊娠组患者和正常妊娠组妇女蜕膜中的含量:流式细胞术检测的结果显示，RSA妊娠组患者蜕膜组织中CD56bright、CD25 bright NK细胞的比率显著高于正常妊娠组妇女，差异有统计学意义（P=0.036，P=0.021）。 3.CD56bright、CD25 bright NK细胞在RSA妊娠组患者和正常妊娠组妇女蜕膜中的表达:免疫荧光检测结果显示，在RSA妊娠组患者蜕膜组织中CD56bright、CD25 bright NK细胞的荧光染色强度显著高于正常妊娠组妇女蜕膜组织中D56bright、CD25 bright NK细胞的荧光染色强度（均P＜0.05）。 4.RSA妊娠患者外周血CD56与蜕膜组织中CD56、外周血中CD25的相关性分析:RSA妊娠患者外周血中CD56与蜕膜组织中CD56的表达呈正相关，相关系数r为0.713;并与外周血中CD25的表达也呈正相关，相关系数为0.367。 5.RSA妊娠组患者和正常妊娠组外周血中TNF-α、 TGF-β的表达:ELISA结果显示，RSA妊娠组患者外周血中TNF-α的浓度明显增加，与正常妊娠组相比，差异有统计学意义(P＜0.05);而TGF-β在妊娠组患者外周血中的浓度显著降低，与正常妊娠组相比，差异有统计学意义(P＜0.05)。 6.RSA妊娠组患者和正常妊娠组蜕膜和绒毛组织中TNF-α、TGF-β的蛋白表达:免疫组织化学法检测结果显示，TNF-α在RSA妊娠组患者蜕膜组织中的表达显著强于正常妊娠组（P＜0.01）;TGF-β在RSA妊娠组患者蜕膜组织中的表达显著低于正常妊娠组（P＜0.05），在绒毛组织中的表达差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论:CD56和CD25与原因不明习惯性流产有关，且CD56与CD25在原因不明习惯性流产的发病过程中有协同作用;原因不明习惯性流产患者外周血中和绒毛组织中TNF-α水平显著提高,提示TNF-α可能在母胎界面局部发挥作用而导致流产;原因不明习惯性流产患者外周血中和绒毛组织中TGF-β水平显著降低，提示TGF-β低水平表达可能与原因不明习惯性流产有关。