慢性炎性疼痛的控制和治疗仍然是临床需要解决的难题之一。以吗啡和昔布类为代表的传统镇痛药虽然能缓解慢性疼痛,但会产生不可避免的副作用。研究表明,EMs,尤其是EM-1,具有与吗啡相当的镇痛能力且副作用较吗啡明显降低。但其酶解稳定性差、生物利用度低,限制了其在临床的应用。我们以EM-1为模板,设计合成了一系列类似物(MEL-EMs)。与母肽相比,MEL-内吗啡肽类似物酶解稳定性和生物利用度均显著提高。本研究旨在进一步探究MEL-类似物在慢性炎性疼痛模型中的镇痛效应及作用机制,为评估其作为慢性炎症候选药物提供参考。在本研究中,我们以MEL-0614和MEL-N1606为研究代表。首先,通过Von Frey、Hargreaves及温浴甩尾实验来评价MEL-类似物的在体镇痛活性。结果表明,MEL-类似物均体现出类似或优于吗啡的镇痛活性。虽然帕瑞昔布也具有镇痛效应,但明显弱于吗啡和MEL-类似物。同时,通过检测胶质细胞特异性标记物探索类似物对过度激活的胶质细胞的抑制能力。发现类似物可以显著抑制胶质细胞的反应性,而吗啡却没有明显的抑制能力。Real-time PCR实验进一步探究类似物的作用机制,结果显示类似物可以显著下调过度表达的IL-1β、TNF-α、COX-2和iNOs。目前的研究表明重复给予吗啡会造成小鼠疼痛敏化。因此,我们利用炎性延长实验来进一步探究MEL-类似物重复给药是否会产生疼痛敏化。结果表明,持续给予类似物未表现出明显的促炎性反应,而吗啡却引起了二次疼痛敏化。持续给药吗啡会显著上调脊髓小胶质细胞的表达,激活TLR4-NLRP3信号通路。而MEL-类似物持续给药不会引起小胶质细胞的二次敏化,也不会激活TLR4信号通路。此外,MEL-类似物具有翻转吗啡二次痛觉敏感的潜力。以上实验结果表明MEL-类似物具有明显的镇痛效应,且重复给药不会引起疼痛敏化。为我们进一步评估MEL-类似物是否可作为慢性炎症潜在的镇痛化合物奠定了基础。