【摘 要】
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从驱蛔中药楝属植物根皮中提取的三萜化合物川楝素(toosendanin,CHO,FW 574,TSN),是一种选择性影响神经递质释放,阻遏神经肌肉和中枢突触传递的突触前阻断剂.TSN还具有显著的
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从驱蛔中药楝属植物根皮中提取的三萜化合物川楝素(toosendanin,C<,30>H<,38>O<,11>,FW 574,TSN),是一种选择性影响神经递质释放,阻遏神经肌肉和中枢突触传递的突触前阻断剂.TSN还具有显著的抗肉毒作用,并能诱导细胞分化、凋亡.鉴于TSN主要生物学效应与胞内外钙离子密切相关,该文以不同方法研究了TSN对运动神经末梢钙电流、细胞胞内钙浓度([Ca<2+>]<,i>)以及对神经递质释放装置钙敏感性的影响,以期阐明TSN的作用机制.主要结果如下:1.利用神经周膜下记录方法,在青蛙胸皮肌标本上观察了TSN对运动神经末梢钙电流的影响.结果表明,TSN能够增大青蛙末梢的慢钙电流,这种作用可被L型钙通道特异阻断剂nifedipine阻遏.2.利用激光共聚焦显微镜钙成像技术,研究了TSN对NG108-15细胞[Ca<2+>]<,i>的调控作用.施加TSN不仅可以增大高钾诱导的分化NG108-15细胞胞内钙瞬变,还能引起其静息的[Ca<2+>]<,i>升高.该效应依赖于胞外钙离子,并可以被nifedipine去除.3.通过酶联荧光法,以大鼠脑皮层突触体为神经末梢标本,观测了TSN对中枢突触主要兴奋性递质谷氨酸(Glu)释放的影响,发现TSN浓度、时间依赖地显著抑制由高钾诱发的依钙性Glu释放;由钙离子导体A23187直接提升[Ca<2+>]<,i>而诱发的Glu释放也被TSN明显抑制.从以上的实验结果推断,TSN通过对外周及中枢L型钙通道介导的钙电流的易化作用提高[Ca<2+>]<,i>,导致胞内钙离子超载,使递质释放装置对钙的敏感性降低,最终神经递质释放受到抑制.TSN抗肉毒和诱导细胞分化、凋亡的作用可能也与其引起的[Ca<2+>]<,i>升高有关.
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