同源四倍体萝卜细胞遗传学研究

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本论文探讨了同源四倍体萝卜花粉母细胞减数分裂、雄核发育的特征及染色体行为,并将二、四倍体萝卜的核型进行了比较分析,以期为多倍体萝卜的遗传育种奠定理论基础并提供理论指导。1.花粉母细胞减数分裂采用常规压片法观察了秋水仙素诱导的同源四倍体萝卜花粉母细胞减数分裂过程中染色体的行为,并与二倍体萝卜作了比较。结果表明:二、四倍体减数分裂主要过程基本相似,两者胞质分裂均为同时型。区别在于:四倍体前期Ⅰ中具有双核仁的花粉母细胞占193.%;中期Ⅰ染色体构型复杂,二价体占38.9%,四价体占46.5%,多价体占13.8%;25.5%的花粉母细胞中观察到落后染色体和染色体桥现象;中期Ⅱ纺锤体有“八字”、垂直和平行三种类型;非正常四分体达6.7%,无十字交叉型四分体,败育率达32.0%。与四倍体相比,二倍体萝卜花粉母细胞减数分裂过程基本正常,未观察到单核仁,二价体比例明显高,占97.1%,极少出现单价体和多价体,基本无落后染色体现象,后期均为正常四分体,败育率为12.1%。2.雄配子体发育过程小孢子形成后进入雄配子体发育阶段,利用“爱氏苏木精染色-冬青油透明”技术,观察了同源四倍体萝卜雄配子体的动态发育过程。结果表明:同源四倍体萝卜小孢子核经第一次有丝分裂产生1个营养核和1个生殖核,生殖核再经第二次有丝分裂形成2个精核,最终形成3-细胞型成熟花粉,与相应的二倍体雄配子的整个发育过程相似;四倍体花粉具2个、3个或4个萌发孔,二倍体多为3孔花粉;四倍体雄配子体发育过程中异常频率为32%,比二倍体高20%,败育主要发生在四分体时期和单核期。3.核型分析结合前人研究染色体的经验,用常规压片法确定了方便易操作的二、四倍体萝卜根尖染色体制片的流程为:4℃浸种12h,23℃恒温培养,挑选生长势强的根尖(根长0.5~1.2cm)至于冰水混合物中预处理12~24h或者用0.002M 8-羟基喹啉处理2~3h,洗净,卡诺固定8~24h,1N HC1 60℃水浴解离10min,把残留HC1洗净,卡宝染色压片。分析比较了两种倍性萝卜的核型,二倍体相对长度变化范围为:8.23%~13.61%,核型公式为:2n=2x=18=10m+8sm,核型分类标准属于3A型;四倍体相对长度变化范围为:7.86%~13.86%,核型公式为:2n=4x=36=24m+12sm,核型分类标准属于2A型。二、四倍体均属于对称核型。
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