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目的:探讨酒精诱导大鼠嗜铬神经瘤细胞PC12自噬和凋亡中相关的分子机制以及关系,以揭示酒精的神经毒性作用,并为酒精致神经细胞损伤的修复提供新的理论思路与实验依据。方法:将PC12细胞分为5组:对照组、去血清组、50mmol·L-1酒精处理组、100mmol·L-1酒精处理组和200mmol·L-1酒精处理组。MTT法确定酒精对细胞增殖的抑制浓度范围;Hoechst 33258染色检测细胞的凋亡的形态学变化、免疫荧光检测细胞的自噬现象;透射电子显微镜观察细胞自噬的超微结构;通过高内涵活细胞成像系统检测细胞的凋亡和坏死率以及自噬率;Western-blotting检测细胞凋亡和自噬相关蛋白表达的变化。结果:MTT法检测酒精对大鼠嗜铬神经瘤细胞PC12增殖有抑制作用。酒精浓度在100 mmol·L-1到400mmol·L-1之间时具有明显的抑制作用。Hoechst荧光染色观察细胞形态学变化,发现胞体皱缩、细胞染色质凝集、细胞核碎裂等典型细胞凋亡特征性变化。LC3免疫荧光染色检测自噬体数量,结果显示自噬体数量变化与浓度呈正相关性,与时间呈负相关性。酒精作用细胞2h时,自噬体数量最多。透射电子显微镜下可见典型的自噬泡存在。高内涵活细胞成像系统检测酒精诱导的PC12的凋亡率与酒精浓度和时间均呈正相关性;而自噬率与酒精浓度呈正相关性,与酒精作用时间呈负相关性。Western-blotting检测发现,在不同浓度的酒精诱导下LC3、Beclin-1、Bcl-2和p53蛋白表达量均高于正常对照组且呈浓度依赖性。结论:1.酒精具有抑制PC12增殖的作用,浓度在100 mmol·L-1~400mmol·L-1抑制作用显著。2.酒精浓度在50mmol·L-1~200mmol·L-1范围内具有诱导细胞凋亡的作用。3.酒精具有诱导细胞自噬的作用,并且发生迅速,2h时自噬强度最大。4.酒精诱导的自噬和凋亡有一定的相关性。