【摘 要】
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氟苯尼考残留于动物源性食品中,会对人的身体健康造成危害,国家明确规定了氟苯尼考的残留限量。目前氟苯尼考残留的检测技术,大多使用LC-MS、HPLC等方法分析检测,这些方法有
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氟苯尼考残留于动物源性食品中,会对人的身体健康造成危害,国家明确规定了氟苯尼考的残留限量。目前氟苯尼考残留的检测技术,大多使用LC-MS、HPLC等方法分析检测,这些方法有一定的优点,比如假阳性率低,检测准确,但同样具有不可忽视的缺点,如样品前处理程序复杂,仪器昂贵,用时长,无法大批量检测,需要专业人员来操作,面对兽药使用量越来越大,兽药残留现象越来越严重的现状,这些缺点直接制约了 FFC残留的现场快速检测,使得食品安全行政执法人员无法对FFC进行有效的监督以及监测。本研究旨在建立了动物源性FFC残留快速检测的酶免疫方法,以达到通过酶免疫法快速准确定量测定FFC残留。本研究首先通过混合酸酐法制备了 FFC的完全抗原,通过紫外分光光度法以及红外光谱的鉴定,证明完全抗原合成成功。选用新西兰大白兔作为免疫动物,经过5次免疫,获得高效价血清,通过proteinA-sepharuse亲和层析法纯化血清,经过SDS-PAGE验证,抗体制备成功。其次建立了 IC-ELISA法,经过对多个实验条件的优化,建立完整的IC-ELISA检测法。根据标准曲线的线性方程为y=-0.19943+1.2313,由此推出其IC50值为4.5μg/mL,检测限为0.53ng/mL。再次建立了BA-ELISA法,通过对实验条件的优化,建立了完整的BA-ELISA法,线性方程为 y=-0.32216+1.5559,IC50值为 1.9μg/mg。检测限为 0.15ng/mg,两种方法均对FFC的结构类似物氯霉素有交叉反应,对其他的FFC功能类似物无交叉,实验结果证明,IC-ELISA法与BA-ELISA都具有强特异性强、高灵敏度,但二者相比,BA-ELISA检测限更低。
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