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第一部分急性冠脉综合征患者血清中GAS6水平及其基因多态性表达背景生长停滞特异性基因6(GAS6)编码的维生素K依赖性蛋白与其受体结合具有广泛的生物学效应,参与调节炎症、血管生成及动脉粥样硬化斑块的形成。已有研究发现GAS6表达水平与斑块的稳定性和中风的发生相关。但是GAS6在冠心病发病机制中的作用如何尚不清楚。目的通过检测冠心病患者外周血中GAS6表达水平,以及对GAS6基因型的分析,探讨GAS6与冠心病发生发展的关系,特别是在急性冠脉综合征(ACS)中GAS6发挥的作用。方法通过酶联免疫吸附试验检测冠心病患者外周血清中GAS6的表达水平,并用单核苷酸多态性(SNP)分析研究GAS6 c.834+7G>A基因型在ACS患者中表达的意义。结果检测发现,健康人群外周血清中GAS6浓度平均值为16.9μg/L(13-28μg/L),而ACS患者外周血清中GAS6浓度则是10.65μg/L(5.7-27.5μg/L)。ACS患者GAS6的基因表达为GG,AG和AA,其基因型频率分别为66%,29%和5%,相比健康人群则分别是35%,45%和20%。GAS6的AA基因型和等位基因A在ACS患者血清中表达低于健康对照(p<0.001)。结论我们的研究表明入院时患者外周血清中GAS6水平可以作生物学指标,反映常见心血管危险因素的存在,并预测心血管事件发生。ACS患者GAS6基因型表达为GG,AG和AA,当GAS6基因表达以AA基因型和等位基因A为主时,ACS发病减少。GAS6与ACS的发病相关,可能对ACS患者具有保护作用。第二部分GAS6对参与巨噬细胞胆固醇代谢关键基因表达的影响背景巨噬细胞中胆固醇代谢调节动脉粥样硬化的形成和发展。清道夫受体摄取氧化低密度脂蛋白导致细胞内游离胆固醇(FC)水平增加,同时ATP盒转运体调节游离胆固醇的流出。游离胆固醇的过量聚集有细胞毒性,可通过合成胆固醇酯(CE)减轻不利影响。ACAT1促进巨噬细胞内CE聚集,从而导致泡沫细胞形成。泡沫细胞形成是早期AS的关键事件,但是GAS6在巨噬源性泡沫细胞形成中的作用尚不清楚。目的观察在巨噬源性泡沫细胞形成中,GAS6对参与细胞内胆固醇代谢关键基因：清道夫受体A (SR-A)、B (CD36)、酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)、ATP结合盒转运体A1(ABCA1)表达的调控作用。方法体外培养人单核细胞系(THP-1),予佛波酯(PMA)孵育后,单核细胞分化成巨噬细胞,进一步予氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理形成泡沫细胞。实验分组包括泡沫细胞组即对照组(仅ox-LDL100mg/L)和GAS6干预组(ox-LDL100mg/L +GAS6 100 ng/ml)。采用油红O染色法观察细胞内脂滴的变化,分别运用real timePCR法检测SR-A、CD36、ABCA1和ACAT-1的mRNA水平,western-blot法检测上述基因的蛋白表达。采用酶比色法分别检测细胞内总胆固醇(TC)和胆固醇酯(CE)含量的变化。结果GAS6可减少细胞内胆固醇酯的合成,并减少胞内游离胆固醇流出率。给予100ng/ml GAS6作用24 h后,细胞内胆固醇酯含量为68.98±1.14 mg/g,与泡沫细胞组61.86±1.12 mg/g相比,差异有统计学意义(p=0.047,<0.05)；游离胆固醇流出率为(15.55±0.75)%,与泡沫细胞组(21.88±1.04)%相比,有显著差异(p=0.039,<0.05)。GAS6上调单核／巨噬细胞泡沫化过程中SR-A mRNA和蛋白表达,下调ACAT-1、ABCA1和CD36 mRNA和蛋白表达。结论GAS6在巨噬源性泡沫细胞形成中,减少胞内胆固醇酯的合成及胆固醇流出率,可能是通过上调SR-A mRNA和蛋白表达,促进巨噬细胞摄取ox-LDL;下调ACAT-1、ABCA1和、CD36 mRNA和蛋白表达,抑制胆固醇酯合成,减少降低胆固醇流出,从而破坏巨噬细胞内胆固醇代谢的稳态,促进泡沫细胞的形成。GAS6可能因此促进动脉粥样硬化的发生发展。第三部分GAS6诱导泡沫细胞形成中对过氧化物酶体增殖物活化受体表达的影响背景过氧化物酶体增殖物活化受体(PPARs)参与调控巨噬细胞和泡沫细胞中胆固醇的代谢。目的以THP-1源性世噬细胞为研究对象,体外观察GAS6作用下过氧化物酶体增殖物活化受体α(PPARα)、γ(PPARγ)的表达。方法体外培养人单核细胞系(THP-1),在佛波酯(PMA)作用下诱导分化为巨噬细胞,加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)后进一步转变为泡沫细胞。实验包括对照组(仅ox-LDL)、不同浓度GAS6 (10ng/ml, 100ng/ml,200 ng/ml,400ng/ml)干预组(24 h)以及不同时间(12h,24h,48 h)于预组(GAS6 100 ng/ml+ox-LDL 100mg/l)。油红O染色法观察细胞内脂滴的含量,运用real time PCR法检测PPARα、PPARγ的mRNA水平,western-blot法检测上述基因的蛋白表达。结果GAS6下调PPARαmRNA和蛋白表达(p<0.05),但无浓度/时间-效应依赖性；同时上调PPARγmRNA和蛋白表达(p<0.05),且呈时间-效应依赖性。结论GAS6可能通过PPARs途径,参与调节世噬细胞内胆固醇代谢。GAS6对PPARα