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目的 通过观察雄激素对小鼠卵母细胞生长分化因子—9(Growth differentiation factor-9,GDF-9)表达的影响,研究GDF-9在卵泡生长发育过程中的作用及其表达调控机制,探讨GDF-9与多囊卵巢综合征(PCOS)卵泡发育停滞、优势化选择受阻的关系。 研究方法 1.体内实验:建立实验性小鼠多囊卵巢(PCO)动物模型—雄激素致不孕小鼠模型,取卵巢标本;所取卵巢组织分别通过原位杂交、免疫组织化学法检测GDF-9 mRNA和GDF-9蛋白的表达,比较雄激素致不孕小鼠与正常小鼠卵巢组织GDF-9mRNA和蛋白表达差异;2.体外实验:分离性成熟昆明小鼠卵泡进行体外培养,基础培养基为M199,实验组培养液中加睾丸酮(1μg/ml),对照组不加睾丸酮,72小时后收集卵泡,获取的卵母细胞行免疫组化检测GDF-9的表达水平,比较两组间GDF-9表达差异。 结果 1.体内实验:共取38个小鼠卵巢组织切片,每组19个,各组检测卵泡数为162、188个,雄激素致不孕小鼠组较对照组卵巢组织GDF-9 mRNA和蛋白表达强度均明显降低,在初级卵泡和次级卵泡阶段尤为明显,差异有显著性(p<0.05)。2.体外实验:免疫组化检测培养液中加雄激素组卵泡65个、对照组70个,雄激素组GDF-9蛋白的表达较对照组明显减弱,差异有显著性,(p<0.05),与体内实验的结果一致。 结论 体内外环境下雄激素均下调卵母细胞GDF-9 mRNA和蛋白的表达水平;表达水平降低的GDF-9与PCOS卵泡发育停滞、成熟障碍有关。