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通过功能平板的筛选,从西太平洋沉积物中获得一株高效降解壳聚糖的菌株。经16S rDNA的测序分析,该菌株属于芽孢杆菌属(Bacilli)。它能够分泌组成型胞外壳聚糖酶。其最适生长温度为30℃,最适的培养基为不含Nacl的2216E培养基,能够耐受的最大压力为30Mpa。利用相似菌株的已知序列设计PCR引物,成功扩增出一条长约1.7kb的DNA片段,该片段包含一个编码有453个氨基酸的壳聚糖酶序列。对该蛋白进行序列分析,其分子量为50.643KDa,N末端具有30个氨基酸的信号肽。将所获得的序列克隆到表达载体pLLp-OMPA上,并获得大量纯化蛋白。通过对该酶蛋白性质的研究,其最适的反应温度为65℃,最适pH为6.0;该酶为内切酶,能够降解壳聚糖最终产生二糖和三糖;该酶蛋白只对壳聚糖具有降解作用,在一定的聚合度内,其降解能力随着多糖链的增加而增强,它能够降解的最小多糖链为4糖。通过对部分酶解壳聚(寡)糖抑菌活性的研究,当壳聚糖的平均分子量大于45KD时对芽孢杆菌才具有明显的抑制作用。应激实验结果表明,当培养基中不含有壳聚糖时,在30Mpa压力应激2小时,壳聚糖酶的表达量明显下降;而当培养基中含有0.5%壳聚糖时,同样的压力应激下,壳聚糖酶的表达量基本没有变化。这表明了该菌株对深海环境的适应。为了进一步提高壳聚糖酶的工业化生产价值,我们利用热诱导载体PBV220对壳聚糖酶进行表达并获得成功,为进一步的大批量生产壳聚糖酶提供良好的工程菌株。