【摘 要】
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目的探讨脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)对糖尿病视网膜病变Müller细胞作用的影响。方法健康雄性SD大鼠,腹腔一次性注射链脲佐菌素(Streptozo
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目的探讨脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)对糖尿病视网膜病变Müller细胞作用的影响。方法健康雄性SD大鼠,腹腔一次性注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)55mg/kg建立糖尿病模型。利用含0.1g/LBSA的磷酸盐缓冲液(Phosphate buffer saline,PBS)制备BDNF注射液。实验随机分为三组:对照组、糖尿病组、BDNF组。BDNF组于糖尿病模型建成4周后开始进行BDNF玻璃体腔内注射,对照组和糖尿病组玻璃体腔内分别注射等剂量的PBS平衡盐溶液。糖尿病模型建模成功8周后,采用可见分光光度计法以及使用谷氨酸含量测定试剂盒和脂质氧化(MDA)检测试剂盒检测视网膜中谷氨酸的浓度变化和视网膜中MDA的含量;免疫荧光检测视网膜中胶质细胞谷氨酸转运体(L-glutamate/L-aspartate transporter,GLAST)、谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)及突触囊泡膜蛋白-突触素(Synaptophysin,SYN)的表达量;Western blot检测视网GLAST、GS、SYN以及caspase-3蛋白表达量。结果视网膜谷氨酸测定结果显示,与对照组相比,糖尿病组大鼠视网膜中谷氨酸浓度明显升高(P<0.01),而BDNF组与对照组相比无明显变化(P>0.05);与糖尿病组相比,BDNF组视网膜中谷氨酸浓度显著减少(P<0.01)。各组大鼠视网膜中MDA含量检测结果显示,与对照组相比,糖尿病组视网膜内MDA含量显著增加(P<0.01),BDNF组与对照组相比无显著差异(P>0.05);与糖尿病组相比,BDNF组视网膜MDA含量明显减少(P<0.01)。免疫荧光检测结果显示,与对照组相比,糖尿病组视网膜Müller细胞中GLAST、GS及视网膜SYN蛋白表达显著下降(P<0.01),BDNF组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);与糖尿病相比,BDNF组大鼠视网膜中GLAST、GS及SYN蛋白表达明显升高(P<0.01)。Western blot检测结合蛋白灰度值分析结果显示,与对照组相比,糖尿病组视网膜GLAST、GS以及SYN蛋白表达显著降低,而caspase-3表达显著增加(P<0.01);BDNF组与对照组相比无明显差异(P>0.05)。与糖尿病组相比,BDNF组视网膜中GLAST、GS及SYN蛋白表达明显升高,caspase-3蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论DR早期给予外源性BDNF能减少视网膜MDA含量和视网膜caspase-3表达进而发挥抗氧化作用,提高视网膜Müller细胞中GLAST、GS的蛋白表达,降低视网膜内的谷氨酸浓度,间接提高视网膜突触素SYN的表达,保护RGC。但BDNF改善SYN表达的具体作用机制还不明确,仍待我们进一步研究和探讨。
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