【摘 要】
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Ghrelin(促生长激素释放肽)是1999年被日本科学家Kojima等发现的一种由28个氨基酸组成的脑肠肽,是生长激素促分泌素受体(Growth hormone secretagogue, GHS)的天然配体。Ghre
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Ghrelin(促生长激素释放肽)是1999年被日本科学家Kojima等发现的一种由28个氨基酸组成的脑肠肽,是生长激素促分泌素受体(Growth hormone secretagogue, GHS)的天然配体。Ghrelin在体内广泛分布决定了其功能的多样性,因此目前已经成为人们研究的重点。黄体是由排卵后的膜黄体细胞和颗粒黄体细胞转化而来的。黄体在形成过程中伴随着很多生物学和分子生物学变化,在LH峰之后排卵之前,合成孕酮所需要的酶细胞色素P450侧链裂解酶(P450scc)和3p类固醇脱氢酶(3β-HSD)的mRNA表达暂时性降低。排卵后和黄体化期间则其mRNA和酶的活性升高,孕酮产量增加,且甾类激素合成灵敏调节蛋白(StAR)的出现与孕酮(P4)的合成在时空上有一致性,因此P4、P450scc、3β-HSD、StAR是黄体形成的标志。为了初步了解Ghrelin在颗粒细胞拟黄体化过程中的作用,我们通过体外培养绵羊卵泡颗粒细胞后进行不同浓度激素调控,建立体外培养颗粒细胞向黄体细胞分化的体系,结果发现联合LH(2.5IU/ml)、FSH(2.5IU/ml)、E2(1ug/mL)组在24h有显著促进孕酮分泌的作用(P<0.05)。通过荧光定量PCR分别检测了黄体化标志基因表达量的变化,与对照组相比黄体化标志基因的表达量都有升高,其中StAR、CYP11差异极显著(P<0.01),3p-HSD、CYP17差异显著(P<0.05), CYP19有升高,但没有差异。确定颗粒细胞黄体化后分别添加不同浓度的Ghrelin,结果发现高浓度组(100ng/ml) Ghrelin都不同程度的抑制了基因的表达,其中3β-HSD、CYP11差异级显著(P<0.01), StAR差异显著(P<0.05)。低浓度组(20ng/ml) Ghrelin较高浓度组对基因的表达量有促进作用,但与空白对照相比也不同程度地抑制了基因的表达。本研究结果为近一步研究激素在黄体形成和退化过程中的影响奠定了基础。
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