水稻的基因组测序的完成，给研究者提出了新的挑战，就是对基因功能的研究。这种以基因功能分析为目标的功能基因组研究已经成为后基因组时代的研究热点。 WD40蛋白家族就是由一组末端常为Trp-Asp(WD)的保守重复序列组成的蛋白，该保守重复序列最先在G蛋白中发现。由于该保守重复序列的氨基酸数目常为40个左右，所以又称之为WD40重复单元。WD40蛋白家族的基因是水稻基因组中数目较多且有着重要功能的一类基因，但是对其相关的生物学功能的研究尚未见报道。根据GnenScan和Gfselector程序预测显示，水稻中的WD基因主要在信号传导、细胞分裂、转录调控、RNA剪切、细胞周期转换及染色质排列等方面行使功能。本论文就从水稻WD基因家族中选取了2个代表性的基因对其功能进行了研究。 首先，通过RGP网站RiceGAAS分析系统，结合拟南芥中已知的WD基因功能的研究进展，本实验在水稻基因组中挑选了2个WD基因(编号P12和B07)，并从水稻粳稻品种中花¨中分别克隆到这2个目标基因。 其次，分别构建了RNA干涉载体、反义表达载体和过量表达载体，通过农杆菌介导法转化粳稻品种石狩白毛和中花¨。结果显示，基因P12和B07构建的组成型启动子的RNA干涉载体经多次转化虽都能获得抗性愈伤，但愈伤均不能分化出转化苗，提取分化阶段的抗性愈伤组织的RNA，进行Northern杂交。杂交结果显示，抗性愈伤组织的表达量与对照相比明显降低，说明由于RNA干涉的作用，导致转化的抗性愈伤组织中基因P12和B07表达量降低，从而导致愈伤组织不能够正常的分化，故推测这2个基因可能对水稻愈伤组织细胞再分化的能力有重要影响；用P12和B07基因构建的反义表达载体进行2次转化实验均得到转化苗。转化植株在表型上出现了明显的矮化现象，抽穗期延迟，且结实率下降，花粉数量也明显减少；并且有大约一半的花粉不可正常染色，表现为败育花粉。经Northern杂交检测，结果表明是该基因的反义表达产生效应，目标基因的表达水平有所降低，推测这两个基因对水稻的生长发育起到调控作用；基因P12和B07构建的化学诱导型启动子的RNA干涉载体2次重复转化均得到转化体。对其T1代的种子诱导愈伤组织，通过对愈伤组织用化学诱导剂噻菌灵(PBZ)诱导RNA干涉的产生，结合分子水平的分析检测结果，确定这2个基因是否影响水稻愈伤组织细胞再分化；用B07基因构建的过量表达载体经2次转化，大部分的抗性愈伤组织没有分化出苗，最后仅获得14株转化植株。对转化体的进一步分析正在进行。