FFDM豚鼠RPE-脉络膜R信号通路的研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiangtianyu1314
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研究目的:   建立早期形觉剥夺性近视(form-deprivation myopia,FDM)动物模型,检测豚鼠视网膜色素上皮-脉络膜中转化生长因子β2(transforming growth factor-beta2,TGF-β2)及活化蛋白-1(activator protein-1,AP-1)的水平;形觉剥夺同时分别给予AP-1的抑制剂姜黄素和视黄酸受体β(retinoic acid receptorβ,RARβ)特异性抑制剂LE540,比较不同处理对屈光状态的影响,并检测视网膜色素上皮-脉络膜中TGF-β2和AP-1的水平,探讨TGF-β2和AP-1在形觉剥夺性近视豚鼠视网膜色素上皮-脉络膜中的作用及其与视磺酸(retinoic acid,RA)信号传递过程的关系。   方法   第一部分:同批次3周龄豚鼠12只,采用戴头套法遮盖左眼,右眼为自身对照眼。饲养至21天作为形觉剥夺动物模型。观测指标:1.实验前后均测量屈光度,实验结束后摘除眼球,测量眼轴长;2.应用ELISA法检测视网膜色素上皮-脉络膜中TGF-β2含量,western blotting方法检测视网膜色素上皮-脉络膜中AP-1含量的变化。   第二部分:另选同种豚鼠40只,随机分为4组,Ⅰ组6只,为正常对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组各12只。Ⅱ组为实验对照组,左眼球后注射0.1%DMSO0.1ml;Ⅲ组左眼球后注射0.1ml(1.5g/L)姜黄素;Ⅳ组左眼球后注射0.1ml(0.1g/L)LE540;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组均隔日给药一次,共3次,并遮盖左眼至第21天。右眼为自身对照眼。观测指标同第一部分。计量资料数据以x±s表示,采用SPSS16.0统计学软件进行统计学处理,并进行正态分布及Levene方差齐性检验后行t检验和方差分析。   结果   第一部分:12只动物实验眼诱导出明显的相对近视,且与自身对照眼比较差异有统计学意义(t=-0.575,P=0.001)。实验眼眼轴均长于自身对照眼(t=-4.920,P=0.000)。实验眼视网膜色素上皮-脉络膜中TGF-β2水平较自身对照眼明显降低(t=-4.933,P=0.004),Western blotting所得c-Fos和GAPDH的灰度图显示,实验眼视网膜色素上皮-脉络膜中AP-1活性较自身对照眼减低(t=-2.832,P=0.037)。   第二部分:实验干预后Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ组的实验眼形成相对近视,三组左右眼屈光度差异均有显著统计学意义(P<0.05)。Ⅲ组和Ⅳ组之间实验眼实验前后屈光度变化差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组干预后左右眼眼轴长度差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组实验眼视网膜色素上皮-脉络膜中TGF-β2含量较自身对照眼明显降低(P<0.05);Ⅰ组实验后双眼视网膜色素上皮-脉络膜中的TGF-β2含量与自身对照眼相比差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组实验后实验眼视网膜色素上皮-脉络膜中的AP-1活性表达与自身对照眼相比均明显降低(P<0.05);Ⅰ组实验后双眼视网膜色素上皮-脉络膜中的AP-1活性表达与自身对照眼相比差异无统计学意义(P>0.05)。   结论   豚鼠形觉剥夺可导致近视发生;豚鼠早期形觉剥夺眼视网膜色素上皮-脉络膜中AP-1活性和TGF-β2表达下调;AP-1抑制剂姜黄素的使用可以影响豚鼠形觉剥夺性近视的形成作用,豚鼠早期形觉剥夺眼视网膜色素上皮-脉络膜中TGF-β2表达受AP-1活性的影响;RARβ抑制剂LE540的使用可以影响豚鼠早期形觉剥夺性近视的形成作用;豚鼠早期形觉剥夺眼视网膜色素上皮-脉络膜中RARβ可以调控AP-1和TGF-β2的活性表达,AP-1和TGF-β2可能是调控豚鼠FDM形成的RA信号通路的重要因子,RA-RARβ-AP-1-TGF-β2的视磺酸信号通路可能是调控豚鼠FDM形成的重要通路之一。
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