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前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)可以反映腋窝淋巴结的转移状况,通过这种微创方法可以筛查出腋窝淋巴结无转移的患者,避免不必要的腋窝清扫。常规病理检查腋窝淋巴结阴性的患者中尚有20%~30%在10年内出现复发转移,这些患者是腋窝淋巴结阴性患者中的高危人群,虽然常规病理检查阴性,但如果进行详细的病理学检查常常可以发现微小转移。本研究分二部分,第一部分为应用不同方法进行SLN活检,第二部分为应用不同方法检测微小转移。 第一部分:应用同位素法和联合法(专利兰V、异硫兰)进行SLN活检,同位素应用99m锝标记的右旋糖苷(99mTc-DX),术前2~4小时皮内注射0.25mCi/0.25ml,分4点注射。术前淋巴显像,术中应用γ—探测仪寻找SLN,若淋巴结与背景放射性计数比大于10则为SLN。联合法中注射同位素的方法与同位素法相同,染料注射在每2个同位素注射点之间,每点注射0.25ml,术中寻找既兰染且放射性计数又高的淋巴结,即为SLN。全部SLN活检病例为121例,成功率为96.7%,假阴性率为8.6%;其中同位素法70例,成功率为94.3%,假阴性率为11.1%;联合法51例,成功率为100%,假阴性率为7.1%。一般经过30例的实践即可以掌握同位素法,但联合法更易于掌握,且优于同位素法。 第二部分:应用多层间隔连续切片、免疫组化和RT—PCR方法检测SLN微小转移,对常规病理检查阴性的SLN分别在100μm、200μm、300μm层面各切片4张,进行HE染色和免疫组化染色(CK19、AE1/3、muc1);另外应用RT—PCR方法检测SLN中CK19和muc1的表达来判断是否有微小转移。多层间隔连续切片和免疫组化染色共检测了121枚SLN,其中14%有微小转移,RT—PCR检测了47枚SLN,其中25.5%有微小转移。 多层间隔连续切片、免疫组化染色和RT—PCR是检测微小转移的有效方法,增加切片数量和增加抗体数量均可以提高检出率。根据本研究结果,综合考虑效益/费用比,建议在间隔100μm的2个层面上做切片,进行HE染色和muc1免疫组化染色;RT—PCR可以比免疫组化发现更多的微小转移。本研究中微小转移病例随访时间较短,数量较少,尚不足以判断微小转移对预后的影响,但研究中发现微小转移与多个不良预后指标相关,因此微小转移也是一个不良预后指标,对生存率是否有影响尚需进一步研究。