【摘 要】
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本研究首选具有产脂肪酶能力的菌种,然后进行分离、筛选、驯化、菌种优化以及菌种鉴定,再将优化后的菌株接入工艺水(用水酶法提取油茶籽油后产生的液体)中发酵,并对去油条件
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本研究首选具有产脂肪酶能力的菌种,然后进行分离、筛选、驯化、菌种优化以及菌种鉴定,再将优化后的菌株接入工艺水(用水酶法提取油茶籽油后产生的液体)中发酵,并对去油条件进行优化,以达到去除油工艺水中的残油、使之有利于下游产品开发利用的目的。本研究包括以下几个方面:1.产脂肪酶菌的分离、筛选、驯化与鉴定将采集的菌种在营养琼脂培养基上分离纯化后,用脂肪酶鉴别培养基进行初筛,选出可产生脂肪酶的菌种进行油茶皂素耐性驯化试验。然后将驯化后的菌种加入工艺水中培养,并检测发酵前后工艺水中油茶皂素的含量,筛选不分解油茶皂素的菌种,同时用核磁共振油脂测定仪测定发酵后油茶籽粕液(工艺水与橄榄油的混合液)的含油量计算去油率,筛选出优良菌种K。通过对菌株的形态特征、菌落形态和生理生化试验结果进行鉴定,鉴定K为褶皱假丝酵母。2.产脂肪酶菌种的优化使用原生质体紫外诱变的方法进行菌种优化,得到原生质体的制备条件为:酶解时间为80min、酶解温度35℃、菌龄生长对数中后期14h;得出较优的紫外诱变时间为10min。3.去油条件的优化以发酵时间、发酵温度、接种量、摇床转速为影响油茶籽粕液发酵去油效果的因素,以发酵后油茶籽粕液的去油率为评价指标,进行响应面试验来确定较优的去油的条件。最终得出去油效果较佳的条件为:发酵时间8d,温度34℃,接种量12%,摇床转速130r/min。4.工艺水综合利用试验用优化后的菌种发酵工艺水,使之其中糖类、蛋白质和脂肪含量降低,再将此液用作提取油茶皂素的原料或丝毛洗涤剂的原料,此举不但避免了废水排放给水生动植物带来的负面影响,而且降低了生产成本,同时为水酶法提取油茶籽油的技术成果转化铺平了道路。
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