论文部分内容阅读
目的检测糖尿病肾病(DN)患者外周血基因组DNA整体甲基化水平和DN患者结缔组织生长因子(CTGF)基因启动子甲基化水平与表达,以便初步了解基因组DNA及CTGF启动子甲基化与DN的关系。方法:根据1999年WHO的糖尿病诊断及分型标准,选取我院肾内科、内分泌科确诊为2型糖尿病住院病人90例和同期本院健康体检者30例。分为:A组(正常对照组)、B组(糖尿病非肾病组)和C组(糖尿病肾病组),分别收集一般资料及临床生化指标。(1)提取各组外周血白细胞DNA;应用高效液相色谱法(HPLC)检测各组总基因组DNA整体甲基化水平;(2)应用甲基化特异性PCR(MSP)及测序检测CTGF基因启动子甲基化状态;(3)应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组血清CTGF蛋白的表达。结果(1)各组总基因组DNA甲基化水平分别为:正常对照组为4.37%±0.01%,糖尿病非肾病组为4.71%±0.03%,糖尿病肾病组为5.23%±0.09%,三组比较差异无统计学意义(p>0.05)。(2)与正常对照组比较,糖尿病非肾病组、糖尿病肾病组患者CTGF基因启动子甲基化程度逐渐减弱,正常对照组CTGF启动子呈甲基化状态,糖尿病非肾病组甲基化水平稍减低,糖尿病肾病组甲基化水平明显减低;(3)与正常对照组比较,糖尿病非肾病组、糖尿病肾病组患者血清CTGF蛋白表达逐渐升高;各组CTGF蛋白表达水平分别为:正常对照组95.84±5.1mg/l,糖尿病非肾病组为127.65±10.3mg/l,糖尿病肾病组为193.44±11.9mg/l;三组比较差异有统计学意义(p<0.05)。结论1、糖尿病肾病组、糖尿病非肾病、正常对照组三组基因组DNA整体甲基化水平无明显差异。2、糖尿病肾病患者CTGF基因启动子甲基化程度明显低于糖尿病非肾病患者,提示CTGF基因启动子的去甲基化可能参与着DN的发生发展。