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目的:1.研究连翘水提物体外对小鼠S180肿瘤细胞的抑制作用并对其活性部位进行初步筛选;2.研究连翘水提物体外对小鼠脾细胞的增殖抑制作用并对其免疫调节作用的活性部位进行初步筛选;3.研究连翘水提物活性部位的免疫调节作用。方法:1.采用小鼠S180肿痛细胞和脾细胞体外增殖模型对连翘水提物的抗肿瘤活性部位及其免疫活性有效部位进行初步筛选:(1)取连翘原药材(生药)加12倍蒸馏水煎煮1.5h,连续3次,合并煎煮液,减压浓缩,得连翘水提物(FSE)。(2)取连翘水提物,依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯等进行萃取,剩余部位用80%乙醇醇沉。分别得到石油醚部位(FSI),乙醚部位(FSⅡ),乙酸乙酯部位(FSⅢ),乙醇溶解部位(FSⅣa)和乙醇沉淀部位(FSⅣb)。(3)采用MTT法,观察连翘水提物及其上述化学部位对S180肿瘤细胞和脾细胞体外增殖的影响,对其有效部位进行初步筛选。2.采用体外和体内多种实验模型对连翘提取物活性部位的免疫调节作用进行研究:Con A诱导的小鼠脾细胞增殖反应检测对T细胞增殖功能的影响、LPS诱导的小鼠脾细胞增殖反应检测对B细胞增殖功能的影响、MTT法检测对腹腔渗出细胞代谢活力的影响、ELISA方法检测对小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α的影响、ELISA方法检测对小鼠脾细胞分泌INF-γ和分泌IL-2的影响、鸡红细胞法检测对小鼠腹腔巨噬细胞(MΦ)体内吞噬功能的影响、有限稀释微量溶血法检测对小鼠血清溶血素水平的影响、耳廓肿胀法检测对小鼠迟发型超敏反应的影响等。结果:1.连翘水提取物以及其乙醇溶解部位(FSⅣa)对小鼠S180肿瘤细胞的体外增殖有显著的抑制作用,与实验对照组比较差异具有显著性(P<0.05)。其余化学部位对小鼠S180肿瘤细胞的体外增殖没有显著的抑制作用。2.连翘水提物以及其乙醇溶解部位(FSⅣa)对小鼠脾细胞增殖的体外增殖有较强的抑制作用,与实验对照组比较差异具有显著性(P<0.05),其乙醇沉淀部位(FSⅣb)在高浓度时(8mg·mL-1)也有显著的抑制,与实验对照组比较差异具有显著性(P=0.008),其余化学部位对小鼠脾细胞的体外增殖没有显著的抑制作用。3.实验结果表明,连翘水提取物的乙醇溶解部位(FSⅣa)对Con A诱导的小鼠脾细胞增殖、LPS诱导的脾细胞增殖、腹腔渗出细胞代谢MTT活力、小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、小鼠脾细胞分泌INF-γ、小鼠脾细胞分泌IL-2、小鼠腹腔巨噬细胞(MΦ)体内吞噬功能、小鼠血清溶血素水平、小鼠迟发型超敏反应等均有不同程度的抑制作用。结论:1.连翘的水提取物对小鼠S180肿瘤细胞的体外增殖有较强的抑制作用,其主要活性部位是其乙醇溶解部位(FSⅣa)。2.连翘的水提取物对小鼠脾细胞的体外增殖有较强的抑制作用,其主要活性部位是其乙醇溶解部位(FSⅣa)。3.连翘的水提取物乙醇溶解部位(FSⅣa)对机体的特异性免疫和非特异性免疫均有一定的抑制作用。