【摘 要】
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乳腺癌是最为常见的恶性肿瘤之一,其发生发展的过程有多种基因的参与,erbB2基因就是其中一个。erbB2在多种肿瘤中高表达,在乳腺癌中则能在30%的样本中检测到其表达过高,而且
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乳腺癌是最为常见的恶性肿瘤之一,其发生发展的过程有多种基因的参与,erbB2基因就是其中一个。erbB2在多种肿瘤中高表达,在乳腺癌中则能在30%的样本中检测到其表达过高,而且预后性差。但是erbB2在乳腺癌发生发展中的生物学功能仍然不是十分清楚。为了发现新的与erbB2阳性乳腺癌相关的基因,我们运用抑制消减杂交技术(正向和反向消减)构建了小鼠乳腺肿瘤组织和正常乳腺组织之间的cDNA消减文库。随后,利用T/A克隆技术将所得的两个消减文库cDNA与pMD18-T载体重组,通过转化导入E.coliDH5α大肠杆菌。在所得到的克隆中随机挑选了800个阳性克隆,并且用菌落PCR进行了验证。用反向斑点杂交技术再次验证后,我们获得80个阳性克隆并进行了DNA测序,测序结果进一步在美国国立生物技术信息中心的GenBank和EST数据库里进行同源性比对。通过这一系列的分析,最后得到了40个在小鼠乳腺肿瘤中异常表达的基因或EST,这些基因或EST有的被报道过在乳腺癌中异常表达,有的则没有报道过,它们涉及信号转导,细胞增殖、生长以及凋亡,细胞骨架,膜蛋白,代谢相关,分泌以及细胞外基质蛋白等各个方面。本研究通过构建小鼠乳腺肿瘤组织和正常乳腺组织之间的cDNA消减文库,即获得了一些已知的乳腺癌相关基因,验证了前人的研究成果;又发现了一些新的乳腺癌相关基因,为进一步研究这些基因的功能打下基础。同时也为今后乳腺癌的诊断及治疗提供了新的理论依据。
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