中国狂犬病病毒G基因分子特征分析

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狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus)引起的一种人兽共患的烈性传染病,一旦感染死亡率几乎为100%。据WHO报告,全球每年有超过5万人死于狂犬病,病例主要集中亚洲和非洲的发展中国家。中国是长期受狂犬病危害的国家之一,尤其是1996年(1996年病例为159例)以后,人狂犬病病例数持续上升,直到2007年(病例数达到3302例)人狂犬病病例数开始逐年下降,但是在全国疫情明显下降的同时,2007年后一些省区的疫情不降反升、甚至从无到有,成为目前我国狂犬病防治工作中需要面对的新问题。近年来我国狂犬病的地域扩散严重,并出现狂犬病潜伏期变短的新流行特征,在部分地区已成为严重的公共卫生问题。G基因编码的糖蛋白位于病毒包膜表面,是唯一能刺激机体产生病毒中和抗体的蛋白;GP是病毒与宿主细胞受体结合的部位,决定病毒的组织嗜性;并与病毒的毒力、致病性相关。因此,进行G基因序列的研究对了解我国狂犬病毒的遗传特征、进化演变特征、毒力及致病性具有重要意义。本研究从分子水平上对这两个基因序列进行主要功能位点的比较分析、同源性分析和种系发生分析,探讨我国狂犬病病毒G基因病原学特征及进化特点;同时探讨这两个基因的上述特征与我国狂犬病高流行和疫情扩散趋势的关系,为制定狂犬病监测计划以及控制狂犬病蔓延的措施提供科学依据。对近5年来狂犬病新疫区或疫情上升地区的狂犬病标本以及传统中高发省区(近5年疫情下降)的标本进行病毒G基因测定,并引用GenBank公开序列进行同源性、功能位点比较和种系发生等分析。2007-2011年中国5个狂犬病新发省区和6个再发省区中有5个省区得到犬、牛或人狂犬病阳性标本共9份,还有8个传统中高发省区的34份犬或人标本均测得病毒G基因全序。43份标本G基因核苷酸序列同源性为87%-100%,推导氨基酸序列同源性为93.7%-100%。通过引用中国具有代表性的流行株G基因序列构建的种系发生树显示:43病毒标本分属于I群和II群,新发再发省区标本均属于I群,且主要集中于IA亚群;宁夏、山西和内蒙古2011年的病毒标本均与当地早些时间分离到的流行株差异较大,而是与河北、北京及天津的流行株亲缘关系较近;上海标本与当地上世纪90年代的流行株属同一分支;陕西标本则与地理位置相邻的四川流行株构成共司循环圈。而在全国的犴犬病进化分析中发现,黄河北岸的河北、天津、内蒙、山西和山东形成了独立的狂犬病病毒进化群;黄河以南的安徽和河南毒株形成了独立的循环;浙江、江苏与上海毒株亲缘关系更近一些;广东、贵州、广西、湖南毒株形成了高发区之间的共同循环圈;在野生动物中,浙江和江西野生动物狂犬病存在循环。结果显示:近5年中国狂犬病新发和再发省区疫情的流行可能与邻近疫情较重省区病毒的传播扩散有关。高发省区存在较多的共循环圈,存在广泛的交叉传播,有些省区中野生动物中存在狂犬病的循环传播。
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