【摘 要】
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目的:研究抗Fas锤头状核酶对COPD模型小鼠T淋巴细胞Fas的表达及其凋亡的影响,观察T淋巴细胞亚群的变化。方法:雄性6周龄清洁级小鼠60只,适应性饲养2周后,随机分为COPD组(50只
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目的:研究抗Fas锤头状核酶对COPD模型小鼠T淋巴细胞Fas的表达及其凋亡的影响,观察T淋巴细胞亚群的变化。方法:雄性6周龄清洁级小鼠60只,适应性饲养2周后,随机分为COPD组(50只)、健康对照组(10只)。采用烟雾暴露法进行COPD小鼠造模,通过小鼠肺功能检查及肺组织病理HE染色对COPD小鼠模型进行评估。造模成功后将COPD小鼠随机分为:A组(COPD组)、B组(空转染组)、C组(抗Fas核酶转染组)、D组(突变核酶转染组),对B、C、D小鼠脾脏T淋巴细胞分别进行慢病毒包装的空转染、FAS核酶转染、突变核酶转染;通过RT-PCR、Western blot对4组T淋巴细胞进行Fas m RNA及Fas蛋白表达的检测,用流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞凋亡水平及CD4+/CD8+比值。结果:(1)通过肺功能检查及肺组织病理HE染色进行模型评估,结果显示,与健康对照组相比,COPD小鼠动态肺顺应性及呼气峰流速降低,气道阻力升高,有统计学意义,P<0.01,并且肺组织病理切片可见肺气肿的形成和慢性炎症细胞浸润,证明COPD小鼠模型是构建成功的。(2)与A组比较,B组Fas m RNA及Fas蛋白表达水平差异无统计学意义,P>0.05。C组和D组Fas m RNA及Fas蛋白表达水平降低,有统计学意义,P<0.05。并且C组与D组相比,C组Fas m RNA及Fas蛋白表达更低,差异有统计学意义,P<0.05。(3)与A组比较,B组CD4+T淋巴细胞凋亡率及CD4+/CD8+比值的差异无统计学意义,P>0.05。C组和D组CD4+T淋巴细胞凋亡率降低、CD4+/CD8+比值升高,有统计学意义,P<0.05。并且C组与D组相比,C组CD4+T淋巴细胞凋亡率更低、CD4+/CD8+比值更高,有统计学意义,P<0.05。结论:COPD小鼠T淋巴细胞经过抗Fas核酶干预,可以有效抑制COPD小鼠T淋巴细胞的Fas m RNA及Fas蛋白的表达,降低COPD小鼠CD4+T淋巴细胞凋亡率,使CD4+/CD8+比值升高。
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