黄曲霉毒素B1对雏鸡空肠黏膜细胞增殖与凋亡的影响及亚硒酸钠对其作用的研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:civili
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AFB1严重影响人和动物的健康,如急性中毒、营养障碍、免疫抑制和诱发癌变,并且对养禽业造成巨大的经济损失。目前关于硒拮抗AFB1对机体的毒性作用逐渐引起人们的重视,并取得了一定的研究成果,但有关AFB1对禽类消化道尤其是空肠细胞增殖和凋亡方面的毒性作用以及硒对其解毒作用还未见报道。本研究采用组织病理学、形态计量学、免疫组化、流式细胞术及荧光定量PCR方法研究黄曲霉毒素B1对雏鸡空肠黏膜细胞增殖与凋亡的损伤及亚硒酸钠对其的保护作用。试验选用240只1日龄艾维茵肉鸡健雏,随机分为4组,每组60只,分别饲喂对照组(硒含量为0.332mg/kg)日粮、AFB1组(0.3mg/kg AFB1)日粮、+Se组(在对照组日粮中添加亚硒酸钠为硒源的0.4mg/kg硒,共0.732mg硒)日粮、FB1+Se组(在AFB1组日粮中添加以亚硒酸钠为硒源的0.4mg/kg硒,共0.732mg硒)日粮共21天。其结果如下:AFB1组空肠主要组织学变化为:7、14和21日龄绒毛高度显著低于对照组(P<0.01),7和14日龄的隐窝深度明显高于对照组(P<0.01),7和14日龄隐窝深度/绒毛高度比值明显低于对照组(P<0.01);此外,在7和14日龄时,AFB1组空肠绒毛尖部部分上皮细胞脱落,固有膜裸露。免疫组化检测显示在7和14日龄时,AFB1组空肠黏膜PCNA阳性细胞数量显著低于对照组(P<0.01),而在7、14和21日龄,AFB1组空肠黏膜TUNEL阳性细胞数量显著高于对照组(P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,和对照组相比,AFB1组7和14日龄时G0/G1期空肠黏膜细胞百分率明显降低(P<0.01或P<0.05),G2/M期细胞百分率明显升高(P<0.01),S期细胞百分率未出现明显差异(P>0.05)。荧光定量PCR检测结果显示为在7、14和21日龄,AFB1组空肠黏膜细胞的Bax和Caspase-3 mRNA表达量显著高于对照组(P<0.01),而Bcl-2 mRNA表达量和Bcl-2/Bax比值明显低于对照组(P<0.01或P<0.05)。+Se组中各项检测指标与对照组比较(P>0.05),总体上无显著性差异,但14日龄时,绒毛高度显著高于对照组(P<0.05);7日龄时,G0/G1期细胞百分率显著高于对照组(P<0.01);7和14日龄时,Bax mRNA表达量明显低于对照组(P<0.05),7日龄时,Bcl-2 mRNA表达量显著高于对照组(P<0.01)。AFB1+Se组空肠组织学与对照组间无明显差异,但7和14日龄绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度比值显著高于AFB1组(P<0.01),隐窝深度明显低于AFB1组(P<0.01)。AFB1+Se组PCNA阳性细胞数量与对照组间无显著差异(P>0.05),但明显多于AFB1组(P<0.01);而在7、14和21日龄时,AFB1+Se组TUNEL阳性细胞数显著多于对照组(P<0.01),而少于AFB1组(P<0.01)。7日龄时AFB1+Se组Go/G1期细胞百分率显著低于对照组(P<0.01),S期细胞百分率明显高于对照组(P<0.05);7日龄和14日龄时,AFB1+Se组Go/G1期细胞百分率明显高于AFB1组(P<0.01或P<0.05),而G2/M期细胞百分率明显低于AFB1组(P<0.01),但AFB1+Se组S期细胞百分率与AFB1组间无显著差异(P>0.05)。AFB1+Se组的Caspase-3 mRNA表达量明显高于对照组(P<0.01),而显著低于AFB1组(P<0.01或P<0.05);Bcl-2 mRNA表达量和Bcl-2/Bax比值显著低于对照组(P<0.01),而明显高于AFB1组(P<0.01)综上所述,日粮中0.3mg/kg AFB1可致雏鸡空肠绒毛受损、组织结构改变,细胞增殖降低,细胞凋亡增强。而日粮中0.732mg/kg硒可保护AFB1所致空肠组织结构的损伤。其可能的机制是:硒上调Bcl-2 mRNA和下调Bax及Caspase-3 mRNA的表达,改善细胞Go/G1期阻滞和增强PCNA表达从而抑制空肠黏膜细胞凋亡和恢复细胞增殖。
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