目的:初步筛选经前期综合征肝气逆证猕猴中枢差异表达基因,构建消减cDNA文库,为系统研究该病证基因表达变化和调控机制,蛋白质组学变化构建良好平台,为揭示中医肝疏泄太过深层机制奠定坚实基础。 方法:以经前期综合征肝气逆证猕猴模型为研究对象,运用SMART技术逆转录并扩增获取全长cDNA;运用抑制性消减杂交技术获取正、反两方向的中枢差异表达基因片段;运用载体重组技术进行质粒重组;运用蓝白斑筛选阳性克隆;运用酶切初步鉴定阳性克隆中插入差异表达基因片段。 结果:正向消减库中初步筛选出192个阳性克隆,反向消减库初步筛选出175个阳性克隆;经酶切鉴定正向库中178个阳性克隆含有差异表达基因插入片段,反向库中124个阳性克隆含有差异表达基因插入片段。 结论:首次成功构建了经前期综合征肝气逆证正向和反向消减cDNA文库,为进一步分离、克隆该病证差异表达基因奠定了基础;首次将抑制性消减杂交技术运用于中医藏象研究领域,从差异表达基因的角度研究了经前期综合征肝气逆证的部分中枢机制和肝疏泄太过的深层机制。