骨关节炎是以进行性关节软骨损伤、软骨基质合成与降解失衡造成关节面完全被破坏为特征的慢性关节病。目前主要采用保守治疗、药物治疗和手术治疗方式,通过延缓疾病发展、预防关节损伤从而达到缓解病症的目的。患者多服用非甾体抗炎药、软骨保护剂等化药,但长期使用效果不佳,多有胃肠道反应等毒副作用。中医理论认为骨关节炎属"痹症",病因为气血痹阻、筋骨失养,治疗方法以补肾活血为主,辅以祛湿止痛。《普济方》中收载的玄胡索散,由延胡索、牛膝、当归、补骨脂组成,用于治疗肝肾不足,血凝气滞,腰腿疼痛等。虽然只有四味药,但组方精炼,体现了中医治疗骨关节炎的整体观念及遣方用药的配伍精髓。玄胡索散作为基础方在临床上应用广泛,并收载于以骨科闻名的中国中医科学院望京医院《骨科方剂药方管理系统》中,但目前尚无针对该复方的相关研究报道,其治疗骨关节炎的作用机制仍是空白,有必要进行深入研究,因此本试验对玄胡索散进行了以下研究:1.玄胡索散及其拆方对补骨脂素与异补骨脂素溶出量的影响采用高效液相色谱法分析玄胡索散及其拆方对补骨脂素与异补骨脂素溶出量的影响,结果发现各拆方组较全方组有显著差异(P<0.05),其中当归、牛膝有助于二者的溶出,而延胡索抑制二者的溶出,为进一步揭示玄胡索散的配伍规律提供了依据。2.运用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱技术分析玄胡索散中所含化学成分基于超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱技术,首次对玄胡索散中所含主要化学成分进行了快速分离与定性,利用优化后的分离与检测条件在13 min内对主要成分实现了有效分离,并通过与标准品、文献及数据库比较保留时间、碎片离子、裂解规律等信息,最终鉴定出57个化合物,为该药后期的药代动力学研究提供了依据。3.网络药理学预测玄胡索散治疗骨关节炎的作用机制基于网络药理学方法,在相关数据库及文献检索玄胡索散中四味中药所含化学成分、化学成分靶点、骨关节炎治疗靶点、蛋白相互作用关系等信息,并结合UPLC-Q-TOF-MS技术发现的配伍新成分,构建相互作用网络,进行网络药理学预测。最终经通路富集分析,发现了多条玄胡索散治疗骨关节炎的信号通路,如调节NO、IL-1β的生物合成,调节炎症反应、响应细胞因子或雌激素刺激,以及抗软骨细胞凋亡等。本研究在系统层面首次揭示了该药治疗骨关节炎的作用机制,并得到了相关化学成分靶点、治疗通路等之间的密切关系,为后期的试验研究提供了依据。4.玄胡索散对骨关节炎大鼠软骨基质的影响雄性SD大鼠随机分组,采用前交叉韧带横断联合部分半月板切除造骨关节炎模型,分别于给药3周、6周后处死大鼠取手术侧膝关节,进行HE染色切片评估软骨损伤程度与Masson染色切片评估胶原的降解。结果发现玄胡索散能明显抑制膝关节软骨损伤与胶原降解(P<0.05),初步证明了玄胡索散治疗骨关节炎的潜在作用,为后期的体外细胞试验与网络药理学预测结果验证试验提供了依据。