麻醉与手术对大鼠认知功能损害和MMP-9表达改变的研究

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目的:通过检测SD大鼠认知功能损害模型血清中MMP-9的表达及脑海马区组织MMP-9基因转录的改变情况;分析其对大鼠麻醉和手术后认知功能损害的影响,并探讨认知功能损害模型中调控MMP-9的表达信号通路。方法:将SD大鼠水迷宫训练6天后随机分为3组,对照组(A组)15只、麻醉组(B组)35只和手术组(C组)35只。大鼠自实验前一日禁食。A组腹部行布比卡因(浓度0.125%,每只总量限30~50mg)浸润麻醉。B组SD大鼠先行腹部布比卡因(浓度及用量同A组)浸润麻醉后异氟醚基础麻醉,再行气管插管和机械通气(1mL/100g,呼吸频率为70-110次/min),浓度为2%的异氟醚持续吸入麻醉2h。C组SD大鼠腹部先行布比卡因(浓度及用量同A组)浸润麻醉,再行剖腹探查术,手术持续2h。分别在术前1d、术后1、3、5、7d利用翻转的Morris水迷宫实验检测其空间记忆和学习能力。测试完毕后分批处死大鼠,ELISA检测不同时间段大鼠血清中MMP-9表达的改变情况;提取大鼠脑海马区组织总RNA,RT-PCR检测大鼠脑海马区组织MMP-9基因转录的改变情况;同时提取大鼠脑海马区组织细胞核蛋白,Western blot检测海马区组织细胞NF-κB的激活情况。结果: Morris水迷宫训练后,测量大鼠游行到达平台的时间和距离,与第1d比较,训练后的大鼠每天游行时间和距离均缩短,差异具有统计学意义(P<0.05);与A组比较,B组和C组处理后第1d大鼠游行时间和距离明显延长,但随着时间点的推移大鼠游行时间和距离逐渐缩短,而C组大鼠游行时间和距离较B组改变更显著,有统计学意义(P<0.05);与A组比较,B组和C组处理后血清MMP-9浓度显著升高,但随着时间点的推移血清MMP-9的表达逐渐降低,而C组血清MMP-9也较B组略高,有统计学意义(P<0.05);与术前1d比较,B组和C组术后第1d大鼠脑海马区组织MMP-9转录水平增强,但随着时间点的推移MMP-9基因转录逐渐减弱;差异具有统计学意义(P<0.05);与术前1d比较,B组和C组大鼠脑海马区组织处理后NF-κB活性显著增高,但随着时间点的推移NF-κB的活性逐渐减弱,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.麻醉与手术均可引起实验鼠认知功能的损害,且手术较麻醉产生的不良影响更大;2.麻醉与手术均可引起实验鼠血清MMP-9浓度增高与脑海马区组织MMP-9的高表达,与麻醉组大鼠比,手术组大鼠血清与脑海马区MMP-9的表达更强烈,持续时间更长;3. NF-κB在大鼠认知功能损害的过程中可能发挥重要作用。
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