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本研究分为二部分:
第一部分:侧脑室注射烟碱对异氟烷小鼠遗忘作用的影响
目的: 探讨吸入麻醉药异氟烷遗忘作用(amnesia)与神经元烟碱受体的关系。
方法: 跳台、避暗实验中,取昆明小鼠100只,雌雄各半,体重20-25g,按分层随机区组设计,分为ip.NS+icV.aCSF,ip.NS+icv.N(2μg、4μg、8μg、16μg)组,ip.Iso+icv.aCSF,ip.Iso+icv.N(2μg、4μg、8μg、16μg)组。ip.Iso+icv.aCSF,ip.Iso+icv.N(2μg、4μg、8μg、16μg)组腹腔注射异氟烷0.3ml·kg-1建立遗忘模型后,观察不同剂量烟碱(nicotine,N)侧脑室注射(intracerebroventricular injection,icv)对跳台潜伏期(Step down latency,SDL)、步入潜伏期(Step through latency,STL)和错误次数(error time)的影响。自主活动实验取昆明小鼠30只,体重20-25g,雌雄各半,随机分为3组:ip NS+icv aCSF组、ip Iso+icy aCSF组和空白对照组,观察异氟烷(0.3mL·kg-1 ip)对小鼠自主活动计数的影响。
结果: 在跳台实验中,与NS+aCSF组相比,NS+N(2μg、4μg、8μg、16μg)组小鼠的SDL、错误次数均无明显变化(P>0.05),表明单独使用此剂量的烟碱对学习记忆无明显影响。与NS+aCSF组相比,Iso+aCSF组小鼠的SDL减少,错误次数增加(P<0.01),表明此剂量异氟烷可产生遗忘作用。与Iso+aCSF组相比,Iso+N(2μg、4μg、8μg、16μg)组小鼠的SDL延长、错误次数减少(P<0.05),但仍达不到NS+aCSF组水平(P<0.05),表明烟碱能部分改善异氟烷的遗忘作用,但不能完全拮抗。在避暗实验中,与NS+aCSF组相比,NS+N(2μg、4μg、8μg、16μg)组小鼠的STL、错误次数均无明显变化(P>0.05),表明单独使用此剂量的烟碱对学习记忆无明显影响。与NS+aCSF组相比,Iso+aCSF组小鼠的STL减少,错误次数增加(P<0.01),表明此剂量异氟烷可产生遗忘作用。与Iso+aCSF组相比,Iso+N(2μg、4μg、8μg、16μg)组小鼠的STL延长、错误次数减少(P<0.05),但仍达不到NS+aCSF组水平(P>0.05),表明烟碱能部分改善异氟烷的遗忘作用,但不能完全拮抗。
结论: 神经元烟碱受体是异氟烷遗忘作用的重要靶位,但非唯一靶位。
第二部分:侧脑室注射烟碱对七氟烷小鼠遗忘作用的影响
目的: 探讨吸入麻醉药七氟烷遗忘(amnesia)作用与神经元烟碱受体的关系。
方法: 跳台、避暗实验中,取昆明小鼠100只,雌雄各半,体重20-25g,按分层随机区组设计,分为ip.NS+icv.aCSF,ip.NS+icv.N(2μg、4μg、8μg、16μg)组,ipSevo+iev.aCSF,ipSevo+icv.N(2μg、4μg、8μg、16μg)组,ipSevo+icv.aCSF,ipSevo+icv.N(2μg、4μg、8μg、16μg)组腹腔注射七氟烷3ml·kg-1建立遗忘模型后,观察不同剂量烟碱(nicotine,N)侧脑室注射(intracerebroventricularinjection,icv)对跳台潜伏期(Step down latency,SDL)、步入潜伏期(Step throughlatency,STL)、错误次数(error time)的影响。自主活动实验中取昆明小鼠30只,体重20-25g,雌雄各半,随机分为3组,ip NS+icv aCSF组、ip Sevo+icv aCSF组和空白对照组,观察七氟烷(3mL·kg-1)对小鼠自主活动的影响。
结果: 在跳台实验中,与NS+aCSF组相比,NS+N(2μg、4μg、8μg、16μg)组小鼠的SDL、错误次数均无明显变化(P>0.05),表明单独使用此剂量的烟碱对学习记忆无明显影响。与NS+aCSF组相比,Sevo+aCSF组小鼠的SDL减少,错误次数增加(P<0.01),表明此剂量七氟烷可产生遗忘(amnesia)作用。与Sevo+aCSF组相比,Sevo+N(2μg、4μg、8μg、16μg)组小鼠的SDL延长、错误次数减少(P<0.05),但仍达不到NS+aCSF组水平(P<0.05),表明烟碱只能部分改善七氟烷的遗忘作用,但不能完全拮抗。在避暗实验中,与NS+aCSF组相比,NS+N(2μg、4μg、8μg、16μg)组小鼠的STL、错误次数均无明显变化(P>0.05),表明单独使用此剂量的烟碱对学习记忆无明显影响。与NS+aCSF组相比,Sevo+aCSF组小鼠的STL减少,错误次数增加(P<0.01),表明此剂量七氟烷可产生遗忘作用。与Scvo+aCSF组相比,Sevo+N(2μg、4μg、8μg、16μg)组小鼠的STL延长错误次数减少(P<0.05),但仍达不到NS+aCSF组水平(P<0.01),表明烟碱只能部分改善七氟烷的遗忘作用,但不能完全拮抗。
结论: 神经元烟碱受体是七氟烷遗忘作用的重要、但非唯一靶位。