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目的:建立肺炎支原体(MP)感染的BALB/c小鼠肺炎支原体肺炎(MPP)模型;应用清肺膏(超微颗粒、普通颗粒)外敷小鼠背俞区来研究清肺膏外敷对MP诱导的MPP小鼠TLR2/NFκB信号通路的调控机制,同时探讨其安全性。材料与方法:筛选SPF级BALB/c小鼠96只,随机分为正常组、模型组、清肺膏Ⅰ组、清肺膏Ⅱ组,每组24只,除正常组外,其余各组均使用支原体菌液滴小鼠鼻腔到达下呼吸道感染机制建立MPP小鼠模型。造模成功后,正常组、模型组小鼠予玉米面外敷小鼠背俞穴,清肺膏Ⅰ组、清肺膏Ⅱ组分别予超微颗粒清肺膏、普通颗粒清肺膏外敷小鼠背俞穴。贴敷面积3×2cm~2,每天贴敷一次,每次30min,连续14天。在造模后第3、7、10、14天对各组小鼠分批处死取材,观察小鼠肺组织病理变化、皮肤病理变化;采用称重法测定肺指数;采用qPCR法检测小鼠肺组织TLR2的表达;ELISA法检测小鼠血清中MyD88、IL-6和TNF-α的水平;Western blot法检测小鼠肺组织中NFκB的表达。结果:1.MP感染后,正常组小鼠肺组织病理切片基本正常;模型组小鼠肺组织出现炎性细胞浸润、肺泡结构破坏等改变,以第7天时最明显,14天时炎症逐渐减轻;治疗后清肺膏Ⅰ组、清肺膏Ⅱ组小鼠分别在造模后第3、7天开始较模型组明显降低,差异显著(P<0.05);与清肺膏Ⅰ组比较,清肺膏Ⅱ组在第10天病理评分明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),第3天与第14天比较,各组病理评分差异显著(P<0.05);与对照组相比,两治疗组应用两种不同剂型的清肺膏外敷小鼠背俞穴区,小鼠局部皮肤肉眼下观察无发红、渗血,显微镜下观察,对照组与治疗组小鼠的表皮结构基本正常。2.MP感染后,模型组小鼠与正常组比较肺指数明显升高,于第7天达峰值,差异有统计学意义(P<0.05),治疗后其肺指数降低,清肺膏Ⅰ组、清肺膏Ⅱ组小鼠分别在治疗后第3、7天较模型组有明显差异(P<0.05);与清肺膏Ⅰ组比较,清肺膏Ⅱ组于第7天肺指数降低显著,有统计学意义(P<0.05)。第3天与第14天比较,各组肺指数差异均无显著性(P>0.05)。3.MP感染后,模型组小鼠TLR2表达升高,于造模后第7天达峰值,后逐渐下降;各时间点与正常组比较均有统计学意义(P<0.05),治疗后TLR2表达降低,第3天两治疗组效果均不明显(P>0.05),第7天清肺膏Ⅰ组始起效,TLR2表达有所降低(P<0.05),而清肺膏Ⅱ组尚未起效(P>0.05),第10天清肺膏Ⅱ组TLR2表达亦有所降低,但不如清肺膏Ⅰ组疗效显著,差异明显(P<0.05),第14天两治疗组均能明显降低TLR2表达表达,两组间比较无明显差异(P>0.05)。4.MP感染后,模型组小鼠MyD88含量升高,于造模后第10天达峰值,后逐渐下降;各时间点与正常组比较均有统计学意义(P<0.05),治疗后MyD88含量降低,第3天两治疗组效果均不明显(P>0.05),第7天清肺膏Ⅰ组始起效,MyD88含量有所降低(P<0.05),而清肺膏Ⅱ组尚未起效(P>0.05),第10天清肺膏Ⅱ组MyD88含量亦有所降低,但不如清肺膏Ⅰ组疗效显著,差异明显(P<0.05),第14天两治疗组均能明显降低MyD88表达,两组间比较无明显差异(P>0.05)。5.MP感染后,模型组小鼠NF-κB蛋白表达升高,于造模后第3天达峰值,后逐渐降低,各时间点与正常组比较均有统计学意义(P<0.05),治疗后NF-κB表达降低,第3天两治疗组效果均不明显(P>0.05),第7天清肺膏Ⅰ组即起效,NF-κB表达有所降低(P<0.05),而清肺膏Ⅱ组尚未起效(P>0.05),第10天清肺膏Ⅱ组NF-κB亦有所降低,但不如清肺膏Ⅰ组疗效显著,差异明显(P<0.05),第14天两治疗组均能明显降低NF-κB表达,两组间比较无明显差异(P>0.05)。6.MP感染后,模型组小鼠IL-6、TNF-α含量升高,均于第7天达峰值,然后逐渐下降,但仍高于正常组水平,各时间点与正常组比较差异显著(P<0.05),两治疗组IL-6、TNF-α含量均有所降低,第3天两治疗组效果均不明显(P>0.05),第7天清肺膏Ⅰ组始起效,IL-6、TNF-α含量均下降(P<0.05),而清肺膏Ⅱ组尚未起效(P>0.05),第10天清肺膏Ⅱ组IL-6、TNF-α含量亦降低,但不如清肺膏Ⅰ组疗效显著,差异明显(P<0.05),第14天两治疗组均能明显降低IL-6、TNF-α含量,两组间比较无明显差异(P>0.05)。结论:1.与普通颗粒相比,超微颗粒清肺膏能减轻MPP小鼠肺组织炎症,其作用在MP感染后期更为明显,且安全有效。2.MPP小鼠肺组织TLR2表达与MyD88、NF-κB表达趋势基本一致,推测MP感染后可能通过依赖TLR2/NFκB信号通路,参与炎症反应;清肺膏能够下调MPP小鼠肺组织中的TLR2、NF-κB蛋白表达水平,也能降低血清中MyD88及IL-6、TNF-α含量。3.清肺膏抗MP感染的机制可能与减少促炎因子的释放,调控TLR2/NF-κB信号通路传导有关。