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目的:(1)研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓基质细胞(BMSCs)向成骨细胞(OB)分化及其RANKL和OPG表达;(2)研究唑来膦酸对MM OB增殖及其RANKL和OPG表达的影响。方法:取MM患者骨髓液3-5 ml密度梯度离心法分离单个核细胞层原代培养形成BMSCs,贴壁传代后采用含有维生素C(50 mg/L),地塞米松(10-8 mol/L),β-甘油磷酸钠(10 mmol/L)的低糖DMEM培养基将BMSCs诱导成OB,倒置相差显微镜观察形态变化并用HE染色、瑞氏染色、碱性磷酸酶染色及VonKossa染色证实OB的存在;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测并比较MM患者与对照组OB的RANKL和OPG mRNA表达水平。采用不同浓度唑来膦酸处理培养的OB,分别作用24 h、48 h和72 h后,通过(1)细胞计数试剂盒(CCK-8)检测OB增殖;(2)RT-PCR检测OB RANKL和OPG mRNA表达;和(3)酶联免疫吸附实验(ELISA)检测相应细胞培养上清液中sRANKL和OPG浓度来考察唑来膦酸的作用。结果:(1)MM患者BMSCs在条件培养基中诱导分化,形成的细胞具备OB形态学特征,ALP染色阳性,能形成钙结节。(2)MM患者OB RANKL mRNA表达高于对照组,与GAPDH的灰度比分别是0.72±0.02和0.65±0.01(P<0.05);OPG mRNA表达低于对照组,与GAPDH的灰度比分别是0.43±0.02和0.49±0.01(P<0.05)。(3)OB用唑来膦酸处理后,唑来膦酸使OB的CCK-8实验吸光值呈不同程度升高。(4)[0]唑来膦酸作用24 h和48 h后,OB RANKL mRNA表达变化不明显。作用72 h,低浓度(10-9 mol/L)唑来膦酸显示能降低RANKL mRNA表达,与对照(0 mol/L)比较,差别有统计学意义(P<0.05)。OB培养上清的sRANKL浓度也呈现类似的变化。(5)唑来膦酸作用24 h后,OB OPG mRNA表达变化不明显。作用48 h,呈不同程度增加,以10-8 mol/L浓度最明显,与对照(0 mol/L)比较,差别有统计学意义(P<0.05)。作用72 h,呈不同程度增加,以10-7 mol/L浓度最明显,与对照(0 mol/L)比较,差别有统计学意义(P<0.05)。OB培养上清的OPG浓度也呈现类似的变化。结论:可以从MM患者的骨髓BMSCs培养出OB;与对照组比较,MM患者OB RANKL mRNA表达增加,OPG mRNA表达减低;唑来膦酸有促进OB增殖的作用;唑来膦酸可能下调OB RANKL表达,并且上调OPG表达。