【摘 要】
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检测去甲基化对结肠癌细胞核内转录因子表达谱的影响。(1)应用不同浓度去甲基化试剂5-Aza-Cdr作用于结肠癌细胞HT-29,用MTT法检测细胞生长曲线、流式细胞仪检测细胞周期及凋
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检测去甲基化对结肠癌细胞核内转录因子表达谱的影响。(1)应用不同浓度去甲基化试剂5-Aza-Cdr作用于结肠癌细胞HT-29,用MTT法检测细胞生长曲线、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡的方法检测5-Aza-Cdr对细胞生物学的影响;(2)选择5-Aza-Cdr最适浓度及作用天数作用于结肠癌细胞HT-29后,用转录因子活性谱芯片检测作用前后细胞核内转录因子表达谱的变化;(3)分析差异表达转录因子,并用western blotting验证部分芯片结果。(1)5-Aza-Cdr作用于结肠癌细胞HT-29后可抑制细胞生长(P<0.01),引起细胞周期G2/M期阻滞,促进细胞凋亡(P<0.001);(2)5-Aza-Cdr作用于结肠癌细胞HT-29后可引起细胞核内部分转录因子表达改变,其中差异表达1.5倍以上的转录因子有25个。(1)通过MTT法、细胞周期及细胞凋亡检测发现去甲基化试剂5-Aza-Cdr作用于结肠癌细胞HT-29可以引起其生物学改变,可抑制其生长,引起细胞周期G2/M期阻滞,并诱导细胞凋亡。(2)结肠癌细胞HT-29核内转录因子大部分不受表观遗传调控,少数受表观遗传调控。5-Aza-Cdr作用于细胞后可引起结肠癌细胞HT-29核内转录因子表达谱部分改变,这些差异表达转录因子可调控包括细胞增殖、细胞分化、细胞周期、细胞凋亡、机体生长发育、药物代谢、激素分泌、基因复制等过程。(3)发现了一些非常重要的信号传导通路上的分子改变,为分析表观遗传学调控在癌细胞信号通路异常的作用提供理论基础。
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