mtDNA4977bp缺失预测肿瘤细胞放射敏感性的体外研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuzhihot9
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究不同单次剂量X射线照射前列腺癌细胞(PC-3)、肝癌细胞(HepG2)和食管癌细胞(EC-9706)所诱导的mtDNA4977bp缺失,比较经照射后细胞的存活分数,探讨mtDNA4977bp缺失用于肿瘤细胞放射敏感性检测的可行性。方法:利用不同剂量的X射线对体外培养的前列腺癌细胞(PC-3)、肝癌细胞(HepG2)和食管癌细胞(EC-9706)进行照射。(1)照射后用改进高盐沉淀法提取细胞线粒体基因;应用普通PCR方法扩增内参片段,应用巢式PCR方法扩增发生mtDNA4977bp缺失的片段;PCR产物凝胶电泳并采集图像,用mtDNA4977bp缺失片段的灰度值与mtDNA内参片段的灰度值之比代表每个照射剂量总体线粒体模板中存在mtDNA4977bp缺失所占的相对比例。(2)应用MTT比色法测定照射后细胞的存活分数。(3)根据存活分数拟合肿瘤细胞的剂量存活曲线;应用SPSS13.0软件进行统计分析,比较三种肿瘤细胞经不同剂量照射诱导的mtDNA4977bp缺失率;比较mtDNA4977bp缺失检出率与细胞存活率之间的关系。结果:1、提取三种肿瘤细胞mtDNA样品,在稍大于15000bp处出现亮度不等的条带,与mtDNA理论值(16569bp)的位置一致;2、X线照射后肿瘤细胞的存活分数,随着照射剂量的增大而减小,小剂量阶段(0Gy、1Gy、2Gy)细胞存活分数下降幅度较小,存活分数均在50%以上;较大剂量阶段,尤其是8Gy照射后细胞存活很少,在同一剂量HepG2的存活分数最低,PC-3最高,EC-9706介于二者之间。3、普通PCR扩增的mtDNA内参片段和巢式PCR扩增的mtDNA4977bp缺失片段与理论预计位置一致。随着照射剂量的增加,三种肿瘤细胞由放射诱导的mtDNA4977bp缺失有所增加;1Gy和26y照射后三种肿瘤细胞的mtDNA4977bp缺失率在统计上无显著性差异;4Gy照射后PC-3分别与HepG2、EC-9706之间存在统计学差异,HepG2和EC-9706之间无统计学差异;8Gy照射后HepG2和EC-9706的缺失率仍在增加,而PC-3的缺失率下降,PC-3的辐射诱导缺失率低于另外两种细胞,但HepG2和EC-9706的缺失率无统计学差异。4、mtDNA4977bp缺失的检出率与MTT法测定的细胞存活分数具有一致性。结论:本实验测定三种肿瘤细胞经X线照射后的存活分数,比较其放射敏感性,同时应用巢式PCR扩增由照射引起mtDNA4977bp缺失的基因片段,发现其mtDNA4977bp缺失与放射敏感性的关系,得出结论如下:1.MTT法测定的三种肿瘤细胞的存活分数,拟合曲线符合细胞多靶单击模型的细胞生存曲线一般特征,得出HepG2具有较高的辐射敏感性,PC-3辐射敏感性相对最低,EC-9706辐射敏感性介于二者之间。2.电离辐射诱导能够出mtDNA4977bp缺失,并与照射剂量呈正相关。得出HepG2和EC-9706较PC-3更敏感,HepG2和EC-9706的mtDNA4977bp缺失率无差异。3.肿瘤细胞存活分数的比较结果和电离辐射诱导mtDNA4977bp缺失率的比较结果具有一致性,而且相关分析后认为HepG2和EC-9706细胞由电离辐射诱导的mtDNA4977bp缺失在一定程度上反映细胞放射敏感性。本研究建立的检测由放射诱导的mtDNA4977bp缺失的方法,可能成为临床预测肿瘤细胞的放射敏感性的方法。
其他文献
目的深入探讨耳穴压豆作用于老年失眠患者治疗中的有效护理方法。方法选取我院收治的40例老年失眠患者为研究对象,采用随机性抽签分组的方式将40例患者分为观察组(n=20)和对
目的:检测手助腹腔镜肝癌切除术和开腹肝癌切除术患者肝癌组织及外周静脉血中粘附分子-1 (ICAM-1)的表达情况,对比两组患者手术前后可溶性ICAM-1(sICAM-1)表达的变化趋势,探
<正>加强党建正当其时"不谋万世者,不足谋一时;不谋全局者,不足谋一域。"当前,中国移动的发展形势发生了深刻变化,着力转型突破,扎实做好巡视整改落实,促进管理提升,公司上下
文章介绍了制造业远程服务系统的功能 ,提出了通过J2EE平台集成现有企业信息系统。在传统应用体系的基础上 ,提出了一种新的基于J2EE平台的制造业远程服务系统集成体系。
目的:1997年,Ji等利用直接差异cDNA序列分析(direct differential cDNA sequencing)克隆出一种新的人类基因,并发现其在浸润性乳腺癌高度表达,而在正常乳腺或良性乳腺病变中
运动心理学与游泳竞赛耕夫文运动心理学是近代崛起的一门边缘科学。它对游泳运动员临场保持最佳竞技状态,在比赛中取得最好成绩能起到十分重要的作用。在游泳水平高的国家如美
将微波辅助提取技术应用于人参多糖提取,通过考察单因素及正交实验确定人参多糖的最佳提取工艺条件:微波功率450W、微波提取时间6min、料液比1∶50,在此条件下多糖提取率为30
自然灾难事件的发生具有随机性,但是它们所带来的破坏以及社会群体和个体对此表现出来的响应能力和恢复能力却不是随机的。其原因之一,是社会弱点的存在影响着自然灾难的作用结
档案学专业学生就业状况是档案学教育质量的重要衡量指标之一,文章选取中国人民大学信息资源管理学院的2012届档案学专业毕业生的就业状况作为分析对象,以翔实的就业数据为基
生物电阻抗测量技术(Bio-impedance Measuring Technology,BIMT)是一种利用生物组织与器官的电特性,提取与人体生理、病理状况相关的生物医学信息的无损伤检测技术。由于该技