免疫牛血清的制备与免疫球蛋白IgG的超滤纯化

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zyhhappy
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  本论文通过对试验牛进行人工免疫,对免疫效果及特异性IgG的性质进行了系统的研究,并应用超滤法分离、提纯血清中的IgG。主要研究结果如下:   以2株人肠道病原菌(沙门氏菌50333、50071)作为抗原,制作疫苗。将所研制的疫苗按有关标准进行物理性质及无菌检验,均符合要求,可以用该疫苗对牛进行人工免疫。   用所研制的疫苗对牛进行系统免疫,结果显示在免疫前后免疫血清和非免疫血清中IgG含量无显著差异,免疫组的IgG含量在免疫中期略有上升,但不显著;通过ELISA法测定IgG的抗体效价,抗体效价在免疫前后有显著变化,50333在第42天时O.D值达到1.20,试验组50071在42天时O.D值达到1.18;免疫2个剂量组的O.D值略高于免疫1个剂量组的O.D值。考虑到成本等问题,最终确定二个免疫组的最佳免疫剂量均为1个剂量。通过对试验牛的人工免疫验证了系统免疫并不增加血清中IgG含量,但IgG的抗体特异性大大增强。   通过研究免疫牛血清中的IgG特异性表明,免疫牛血清中的特异性IgG较普通血清中的IgG可显著抑制50333和50071的生长,这是由IgG的特异性所决定的;用胃蛋白酶和胰蛋白酶对IgG进行消化,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,对于胃液pH值相对较高的婴儿来讲,IgG进入消化道后仍可保持其活性,在肠道中,胰蛋白酶对IgG活性影响极小。   
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