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现证实表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-α(TGF-α)、两性调节蛋白(AR)、肝素结合性EGF样生长因子(HB-EGF)、β-细胞调节素(BTC)等多种细胞因子分子结构相似，且均与表皮生长因子受体(EGF-R)结合，称为EGF家族。该家族各成员的生物活性谱基本相同，参与调控多种细胞的生长、增殖、分化、转化和凋亡，与消化性溃疡的形成、修复及肿瘤的发生、发展密切相关。新近的研究表明EGF家族各成员间功能存在替代性，且均具有自诱导表达及相互交叉诱导表达的功能，因此EGF家族以整体功能总效应发挥生物学功能，分析和检测EGF家族整体生物活性水平可能对临床某些疾病的诊断具有重要意义。 为建立分析EGF家族整体生物活性水平(即生物活性EGF)的检测方法，本研究的首要目标是将人表皮生长因子受体(hEGF-R)膜外配体结合区表达于大肠杆菌菌膜上，建立功能性表达hEGF-R的大肠杆菌表达体。由于大肠杆菌具有独特的快速繁殖、易于保存、易于操作的特点，可迅速大量获得载有功能活性hEGF-R的大肠杆菌菌体，并以此建立放射配体分析法，可能会成为准确地检测生物活性EGF水平的新型定量分析方法，并可能具有广泛的推广应用价值。 已有研究证实hEGF-R膜外部分可分为四区，第Ⅰ区、第Ⅲ区是受体与配体结合区，其中第Ⅲ区起关键性作用。据此设计引物： 5′CCAACCATGGTCCGCAAGTGTAAGAAGTGC3′(5′引物末端加NcoⅠ位点)； 5′GCAGATCTTTAGCACCAAGGCATGGCAGAC3′(3′引物末端加Bg1Ⅱ位点)，PCR结果从全长hEGF-R cDNA质粒上扩增出一条约560kb的DNA片段，平端化后将其克隆于PUC19，测序结果证实此片段与hEGF-R膜外第Ⅲ区编码序列(hEGF-RⅢ)相同。用NcoⅠ和Bg1Ⅱ双酶切切出hEGF-RⅢ片段，定向克隆于表面呈现载体