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红枣作为药食同源的一种传统食物,营养丰富,研究发现其含有大量糖类、蛋白质、多糖以及生物碱、三萜酸、类黄酮等生物活性物质。已经证实红枣多糖具有多种活性,例如可以防治便秘,改善肠道菌群,预防直、结肠癌,预防心血管疾病和糖尿病等功能。而红枣以及枣渣多糖对肠黏膜免疫功能的影响研究尚未引起大众的关注,因此深入研究枣渣多糖的功能,对于红枣的高附加值利用具有重要意义。主要研究内容和结果包括:
1.以食品厂下脚料枣渣为原料,分离提取枣渣多糖提取物,采用HPLC和FT-IR试验研究了多糖的组成。多糖提取结果表明,枣渣中多糖的提取率为7.16%,纯化后的多糖的纯度为72.5%,HPLC结果显示,分离得到的枣渣多糖主要由半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸和阿拉伯糖等单糖组成,不同多糖中的单糖组成和摩尔比存在一定的差异。FT-IR结果显示,4种物质中,出现8个不同的吸收峰,分别在3392.78cm-1,2939.57cm-1,1635.63cm-1,1417.67cm-1,1242.15cm-1,1018.41cm-1,835.17cm-1和918.11cm-1左右处出现色谱,这几个峰是糖类物质红外光谱的主要特征峰。
2.以ICR雄性小鼠作为实验动物,采用腹腔注射环磷酰胺(CTX)构建肠道黏膜免疫损伤动物模型,研究枣渣多糖提取物对CTX所致小鼠肠黏膜免疫功能损伤的保护作用,并初步探讨其机制。结果显示,与模型组比较,300mg/kg·bw剂量组可极显著提高小肠组织中SIgA、IgA水平(P<0.01),较模型组提高39.2%、31.1%,极显著提高小肠组织中IL-2、IL-10水平(P<0.01),较模型组提高1.6%、18.3%,增加血清中IL-4、IL-10、IFN-γ水平(P<0.01),分别较模型组增加31.1%、28.0%、0.8%,显著提高小鼠脾淋巴细胞转化值(P<0.05),较模型组提高了20.0%,降低外周血T淋巴细胞、Th细胞百分含量(P<0.01),比模型组分别降低了15.7%、18.5%。
3.以小鼠盲肠为研究对象,采用高通量测序法检测小鼠肠道中微生物菌群的变化,研究枣渣多糖提取物对CTX所致免疫损伤小鼠大肠中的肠道菌群的影响。16S rDNA高通量测序结果表明,CTX组肠道菌群物种丰度和多样性最低,多糖组的小鼠大肠中肠道物种丰度及多样性和CTX模型组相比都明显增加;与CTX组比较,多糖组小鼠大肠肠道有益的厚壁菌门所占比例明显增多,有害的拟杆菌门所占比例明显减少,这两种优势菌群所占比例的和呈现增加的趋势;同时Beta多样性结果和环境因子分析结果表明CTX组和其他四组的微生物群落组成相差很大,这可能是因为CTX对小鼠的肠道微生物的组成影响很大造成的。实验结果表明,枣渣多糖提取物具有拮抗CTX导致的肠道菌群紊乱的功能。
结论:HPLC结果显示,分离得到的枣渣多糖主要由半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸和阿拉伯糖等单糖组成,动物试验表明,枣渣多糖提取物有改善小鼠肠道黏膜免疫紊乱和肠道菌群紊乱的功能,维持机体免疫系统的相对稳定,分析其原因,多糖很可能是通过肠道黏膜免疫系统来发挥免疫作用的,本实验为后期进一步研究枣渣多糖是如何发挥肠道黏膜免疫的保护作用的机理研究奠定了一定的基础。
1.以食品厂下脚料枣渣为原料,分离提取枣渣多糖提取物,采用HPLC和FT-IR试验研究了多糖的组成。多糖提取结果表明,枣渣中多糖的提取率为7.16%,纯化后的多糖的纯度为72.5%,HPLC结果显示,分离得到的枣渣多糖主要由半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸和阿拉伯糖等单糖组成,不同多糖中的单糖组成和摩尔比存在一定的差异。FT-IR结果显示,4种物质中,出现8个不同的吸收峰,分别在3392.78cm-1,2939.57cm-1,1635.63cm-1,1417.67cm-1,1242.15cm-1,1018.41cm-1,835.17cm-1和918.11cm-1左右处出现色谱,这几个峰是糖类物质红外光谱的主要特征峰。
2.以ICR雄性小鼠作为实验动物,采用腹腔注射环磷酰胺(CTX)构建肠道黏膜免疫损伤动物模型,研究枣渣多糖提取物对CTX所致小鼠肠黏膜免疫功能损伤的保护作用,并初步探讨其机制。结果显示,与模型组比较,300mg/kg·bw剂量组可极显著提高小肠组织中SIgA、IgA水平(P<0.01),较模型组提高39.2%、31.1%,极显著提高小肠组织中IL-2、IL-10水平(P<0.01),较模型组提高1.6%、18.3%,增加血清中IL-4、IL-10、IFN-γ水平(P<0.01),分别较模型组增加31.1%、28.0%、0.8%,显著提高小鼠脾淋巴细胞转化值(P<0.05),较模型组提高了20.0%,降低外周血T淋巴细胞、Th细胞百分含量(P<0.01),比模型组分别降低了15.7%、18.5%。
3.以小鼠盲肠为研究对象,采用高通量测序法检测小鼠肠道中微生物菌群的变化,研究枣渣多糖提取物对CTX所致免疫损伤小鼠大肠中的肠道菌群的影响。16S rDNA高通量测序结果表明,CTX组肠道菌群物种丰度和多样性最低,多糖组的小鼠大肠中肠道物种丰度及多样性和CTX模型组相比都明显增加;与CTX组比较,多糖组小鼠大肠肠道有益的厚壁菌门所占比例明显增多,有害的拟杆菌门所占比例明显减少,这两种优势菌群所占比例的和呈现增加的趋势;同时Beta多样性结果和环境因子分析结果表明CTX组和其他四组的微生物群落组成相差很大,这可能是因为CTX对小鼠的肠道微生物的组成影响很大造成的。实验结果表明,枣渣多糖提取物具有拮抗CTX导致的肠道菌群紊乱的功能。
结论:HPLC结果显示,分离得到的枣渣多糖主要由半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸和阿拉伯糖等单糖组成,动物试验表明,枣渣多糖提取物有改善小鼠肠道黏膜免疫紊乱和肠道菌群紊乱的功能,维持机体免疫系统的相对稳定,分析其原因,多糖很可能是通过肠道黏膜免疫系统来发挥免疫作用的,本实验为后期进一步研究枣渣多糖是如何发挥肠道黏膜免疫的保护作用的机理研究奠定了一定的基础。