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目的：应用原位RT-PCR和免疫组织化学的方法分别检测H2-Calponin mRNA及其蛋白在肝细胞癌等肝病组织中的表达分布,构建H2-Calponin siRNA表达载体并将其稳定转染至肝细胞癌HepG2细胞中,建立H2-Calponin“基因敲低”(knockdown)的细胞模型,在此基础上,探讨H2-Calponin-siRNA对肝细胞癌细胞侵袭转移潜能的影响作用,为肝细胞癌的靶向治疗提供理论基础。方法：(1)分别应用原位RT-PCR及免疫组织化学技术检测H2-Calponin mRNA与其蛋白在肝细胞癌等肝病组织中的表达分布：(2)利用生物信息学技术在线设计特异性H2-Calponin siRNA,并构建相应的表达载体；(3)将H2-Calponin siRNA表达载体及阴性对照载体分别转染肝细胞癌HepG2细胞,通过G418试剂的筛选建立稳定转染的“基因敲低”细胞模型：(4)荧光定量PCR及Western Blot技术分别检测基因敲低后细胞内H2-Calponin mRNA及其蛋白的表达,鉴定H2-Calponin siRNA表达载体的功能；(5)细胞生物学行为观测：划痕实验检测细胞的迁移能力,CCK8法检测细胞增殖状况,流式细胞仪检测细胞周期,transwell小室检测细胞的侵袭能力。结果：(1)H2-Calponin mRNA在32例肝细胞癌、30例肝细胞癌伴转移组织、24例肝炎及32例肝硬化组织中表达的阳性率分别为41.7%、56.7%、46.9%和41.7%,两两比较无统计学意义,但在肝细胞癌伴转移组织中表达最高；(2)H2-Calponin蛋白在肝细胞癌、肝细胞癌伴转移组织、肝炎及肝硬化组织中表达的阳性率分别为37.5%、63.33%、20.83%和31.25%,H2-Calponin在肝细胞癌伴转移组织中阳性率高,有统计学意义；肝细胞癌伴转移组织中的平均光密度值最高(0.061±0.013),其次是肝细胞癌组织(0.054±0.013),稍低的为肝硬化和肝炎,其平均光密度值分别为0.049±0.021和0.048±0.015,肝细胞癌伴转移组织中平均光密度值较高,有统计学意义,但H2-Calponin蛋白在肝细胞癌、肝细胞癌伴转移组织中的表达与患者的性别、年龄及病理分级无统计学意义。(3)分别将保温小室和免疫组化PAP笔应用于组织芯片免疫组织化学技术中以防止反应液溢出,结果发现组织芯片边缘部位与中央部位平均光密度值差异无统计学意义,可认为不存在明显“边缘效应”。(4)将四种H2-Calponin siRNA干扰序列通过表达载体转染入肝细胞癌HepG2细胞,通过G418筛选后经荧光定量PCR实验检测H2-Calponin mRNA的表达,发现干扰序列1相对表达率约41%,Western Blot实验结果发现各干扰组H2-Calponin蛋白表达下降,有统计学意义,结合荧光定量PCR和Western Blot实验结果选用干扰序列1进行后续生物学形为实验。(5)划痕实验结果提示HepG2组和HepG2/阴性对照组细胞在划痕24小时后趋于愈合,而转染HepG2/H2-Calponin-siRNA组细胞划痕的愈合能力显著减弱；CCK-8实验发现三组细胞生长曲线相类似,三者间增殖程度无显著性差异；流式细胞仪检测细胞周期发现HepG2/H2-Calponin-siRNA与HepG2阴性对照、HepG2组比较,G0/G1期比率减少,S期细胞比例增加,但无统计学意义；HepG2/H2-Calponin-siRNA组、HepG2/阴性对照和HepG2组平均穿膜细胞数为7.6、9和8.8,差别有统计学意义。结论：(1)肝细胞癌伴转移组织中H2-Calponin mRNA及蛋白表达均高于肝细胞癌、肝炎和肝硬化组织。(2)在免疫组化实验中保温小室可替代PAP笔。(3)本研究成功构建了H2-Calponin siRNA真核表达载体,将之转移到HepG2细胞中可有效降低H2-Calponin mRNA及蛋白的表达水平；(4)H2-Calponin-siRNA表达载体转染的肝细胞癌HepG2细胞在形态、细胞周期和体外增殖能力方面无显著影响,但可明显抑制其细胞运动与迁移能力,以及在Matrigel基质上的粘附能力和体外侵袭能力。