药物代谢研究在药物研究与开发上占有举足轻重的地位,中药成分代谢研究近几年也越来越引起人们的重视。中药成分代谢研究对中药作用机制探讨,中药新药研究,中药质量评价和临床用药等都具有指导和推动作用,已成为中药现代化研究的重要切入点之一。高效液相色谱串联质谱(LC-MS)技术具有快速、灵敏、专属性强、样品预处理简单等特点,特别适合研究高极性、热不稳定性、高分子质量和低挥发度等有机化合物。将液质联用技术用于中药成分代谢研究,对于推动现代中药代谢研究具有重要的实用价值。 本文以中药中四种莨菪烷类生物碱成分-樟柳碱(Anisodine)、东莨菪碱(Scopolamine)、山莨菪碱(Anisodamine)和阿托品(Atropine)为研究对象,应用液相色谱串联电喷雾离子化离子阱质谱(LC/ESI-ITMS")技术,研究了上述生物碱在大鼠肝微粒体孵育液中的主要代谢产物,探讨了上述生物碱大鼠肝脏生物转化途径。具体研究思路如下： (1)确定四种莨菪烷类生物碱色谱保留时间,分析总结电喷雾质谱的一级电离规律和多级质谱裂解规律,以此作为其大鼠肝微粒体中代谢物分析鉴定的依据。 (2)根据上述生物碱的结构及药物生物转化的一般规律,推测上述生物碱可能的代谢物结构及其分子量。 (3)各生物碱的体外代谢实验采用大鼠肝微粒体,即将四种生物碱分别与肝微粒体于37℃孵育1h,之后取孵育样纯化,再分析纯化样品的一级质谱全扫描图,从中发现可能代谢物的分子离子峰。 (4)对发现的可能代谢物进行选择离子反应检测(SRM),根据各物质的二、三级质谱碎裂特征,确定或推导其化合物结构。 (5)根据各药代谢物结构,初步推测各药在大鼠肝脏中代谢转化过程。 根据上述研究思路,各生物碱在大鼠肝微粒体中的主要代谢物分别为：在樟柳碱肝微粒体孵育液中鉴定出水解和脱水两种I相代谢产物(莨菪品及脱水去甲基樟柳碱);在山莨菪碱肝微粒体孵育液中鉴定出N-去甲基、苯环氧化和N-氧化物三种I相代谢产物(去甲基山莨菪碱、N-氧化山莨菪碱和羟基化山莨菪碱);在东莨菪碱肝微粒体孵育液中鉴定出去甲基、水解和脱水三种I相代谢产物(莨菪品、脱水东莨菪碱及去甲基东莨菪碱);在阿托品肝微粒体孵育液中鉴定出水解和氧化两种I相代谢产物(托品和羟基阿托品)。