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本论文主要研究了人参皂苷Type Ⅲ酶对不同人参二醇类单体皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rg3、Rd、F2的酶反应动力学;得到如下结论:尝试了人参的主要皂苷:PPD的Rb1、Rb2、Rc、Rd皂苷和PPT的Re、Rg1皂苷,热稳定性好,其水溶液在120℃加热3～5小时,基本不分解。40g的人参叶PPD皂苷,用甲醇浸提除掉渣子,再用硅胶柱层析法分离得到4.74g较纯的Rd,得率为11.8%;得到较纯的Rb13.59g,得率为9%。通过HPLC高效液相色谱分析人参皂苷Type Ⅲ酶,测出一个单峰,说明酶转化反应中所用的人参皂苷Type Ⅲ酶的纯度很高,符合实验要求;其SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上的酶蛋白分子量约为72.4 kDa。酶反应最佳pH为7.0,最佳温度是37℃。人参皂苷Type Ⅲ酶,水解Rb1分子中C-3位置的一个糖基可使Rb1转化为稀有皂苷GypXⅦ,而GypXⅦ进一步水解生成GypLXXV;水解Rb2分子中C-3位置的一个糖基生成C-O、C-O进一步水解成C-Y;水解Rc分子中C-3位置的一个糖基生成C-Mcl,水解Rd分子中C-3位置上一个糖基生成F2、F2进一步水解成C-K,水解Rg3分子中C-3位置的一个糖基生成Rh2,水解F2分子中C-3位置上一个糖基生成C-K。在酶反应最佳pH为7.0,最佳温度是37 ℃,酶蛋白浓度为0.16%的条件下,研究酶对Rb]、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rg3、F2等、单体皂苷的反应动力学;其米氏常数Km值分别为 4.08mM/L、9.09mM/L、8.85mM/L、3.85mM/L、9.7 mM/L、11.36mM/L、9.7 mM/L、12.85 mM/L;Vm 值分别为 16.64 mM/Lh、14.31 mM/Lh、14.6 mM/Lh、23.15 mM/Lh、1.395 mM/Lh、1.81 mM/Lh、0.41 mM/Lh。一般米氏常数Vm值大、Km值小,酶催化反应速度快;由此得知,人参皂苷TypeⅢ对不同底物间的反应速度、依次为Rc>Rb1>Rb3>Rb2>Rg3>Rd>F2;人参皂苷TypeⅢ酶对底物Rb1、Rb2、Rb3、Rc的转化速率远大于Rd、Rg3、F2。除了 F2,Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd13碳位置上的糖基是一样的,但是Km值有不小的差别,其原因可能是20碳位置上糖基的不同影响了 3碳位置上糖的水解。