对虾白斑综合征病毒（WSSV）是对对虾养殖业产生巨大危害的病毒，目前还未发现有效的治疗措施。为了寻找对该病毒的有效防控方法，本文构建了三种含VP28的融合蛋白并研究其对凡纳滨对虾的保护作用，在最后一节内容中，克隆了与WSSV感染过程相关的F0-ATP合酶序列的全长，以上研究为后续实验的开展提供基础。1.针对VP28C和Hsp70p这两段目的基因，设计引物，经过PCR扩增分别得到了目的基因，经双酶切和连接反应，成功的将这两个片段克隆至载体pBAD/gⅢA中。通过转化反应，将构建的重组载体导入到感受态细胞Top10中。将大肠杆菌进行大量的培养后，添加一定浓度的诱导剂，使构建的融合蛋白在大肠杆菌内得到了成功的表达，利用SDS-PAGE和Western-blot对表达的蛋白进行了验证。通过Co2+亲和层析和超滤技术获得纯化的目的蛋白获得了浓度较高的纯化蛋白。通过肌肉注射的方式将蛋白注射到对虾体内，采用病料投喂方式进行凡纳滨对虾感染，结果表明，构建的融合蛋白对对虾有一定的保护作用。通过荧光定量实验，检测了对虾体内与免疫反应相关的几种基因的表达量的变化，结果发现，注射蛋白的对虾组与对照组相比，其免疫相关的基因SOD、LZM、CAT和STAT的表达量有不同程度的增加，进一步验证了该蛋白对对虾的保护作用。2.针对凡纳滨对虾铁蛋白基因序列，设计了相应的引物，利用PCR技术，扩增得到了凡纳滨对虾的铁蛋白基因，经过双酶切和连接反应，将铁蛋白基因和VP28C基因这两段目的基因成功克隆至pBAD/gⅢA中。通过转化反应，将构建好的重组载体成功导入到感受态细胞大肠杆菌中。测序结果表明构建的重组载体序列完全正确。在将大肠杆菌进行大量培养后，通过加入一定浓度的诱导剂L-Arab，使构建的重组载体在大肠杆菌内进行了成功的表达。通过Co2+亲和层析和超滤技术，获得了纯度较高的目的蛋白。利用SDS-PAGE和Western-blot对纯化获得的蛋白进行了验证。在养殖实验中，通过肌肉注射的方式将该蛋白注射到对虾的体内，在免疫期过后通过给对虾投喂病料的方式让对虾感染WSSV以研究该蛋白对对虾的保护作用。统计的累计死亡率实验结果表明，与对照组相比该蛋白对对虾有一定的保护作用并且在病毒感染的前期其保护效果更加明显。通过荧光定量实验分析了对虾体内LGBP和LvP38基因的表达量的变化，结果表明，在注射该蛋白后对虾体内这两种基因的表达量与对照组相比明显的增加，这进一步验证了该蛋白对凡纳滨对虾对虾的保护作用。3.通过查阅文献资料，获得了细胞穿透肽（TAT）的基因序列，通过在线设计优化软件，对这段序列进行了优化和合成，使其更适于在大肠杆菌中表达。通过双酶切和连接反应，构建TAT-VP28C重组载体。经转化反应将该载体导入到大肠杆菌，在将大肠杆菌进行大量培养后，通过添加一定浓度的L-阿拉伯糖诱导蛋白表达，该蛋白得到了成功的表达。通过Co2+亲和层析技术对该蛋白进行了纯化，但是在蛋白纯化后的蛋白复性中，该蛋白出现了大量的析出，在后续的实验中,复性条件还需要进一步的摸索。4.根据已经公布的F0-ATP合酶的部分序列设计相应的引物，采用RACE方法克隆得到了凡纳滨对虾的F0-ATP合酶基因的全长cDNA序列。生物信息学分析显示，该基因的开放阅读框744bp，编码248个氨基酸，分子量为28.2kD。Blast结果显示，克隆得到的cDNA序列所编码的氨基酸序列与海虱(Caligusclemensi) F0-ATP合酶β亚基的同源性为50%,与黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster) F0-ATP合酶β亚基的同源性为60%。为了研究F0-ATP合酶在对虾体内组织的分布情况，利用流式细胞仪检测了F0-ATP合酶在凡纳滨对虾血细胞上的分布,结果表明，F0-ATP合酶在凡纳滨对虾血细胞中有大量分布。本研究为深入研究该基因的作用提供基础。