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背景:乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤,占女性新发恶性肿瘤总数的25%,死亡率占女性恶性肿瘤的15%,严重危害广大女性身体健康和生命安全。随着治疗方案的完善,治疗方式的改进,乳腺癌的治疗效果有了显著的改善,5年观察生存率为72.7%,但乳腺癌高度异质性的特点使其影响预后因素众多,如不同分子分型、有无转移等都与预后密切相关,特别是有远处转移的患者5年生存率仅为23.3%,中位生存期仅为1.2年。因此,针对乳腺癌转移分子机制的研究以及相关肿瘤标志物的筛选鉴定,有益于研发新型特异性靶向药物,对改善乳腺癌治疗的效果具有相当重要的理论及应用价值。近年来国内外多篇文献报道:在乳腺癌的发生发展以及治疗过程中,肿瘤浸润转移与上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)密切相关,肿瘤细胞发生EMT时,丢失细胞黏附分子E-cadherin(E-cadherin表达下调是EMT发生的重要标志),上皮细胞失去极性,运动迁移能力增强,容易自原发病灶脱落,并且更加容易穿透血管壁,进而远处迁移至全身;与此同时,EMT可诱导乳腺癌细胞发生干细胞化改变使其比例增多,从而增强了肿瘤细胞的抗凋亡及远处转移能力,因此,EMT是肿瘤发生局部浸润及远处转移的关键事件。在本小组的前期研究中发现,在乳腺癌组织中Sam68过表达,且已证实Sam68的表达水平与E-钙黏蛋白(E-cadherin)呈负相关。通过沉默间质样高侵袭性乳腺癌MDA-MB-231细胞中Sam68基因降低其蛋白的表达水平,可上调E-cadherin蛋白的表达水平,进而抑制肿瘤EMT的发生,降低肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。但Sam68的过表达能否促进乳腺癌MCF-7细胞(上皮样细胞)发生EMT转变,进而增强肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭的能力,尚待研究。目的:探讨Sam68(Src-associated in mitosis 68 kD)的过表达对乳腺癌MCF-7细胞发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)以及肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:构建质粒载体,分别设置实验组、阴性对照组,实验组MCF-7细胞转染携带Sam68基因的pcDNA-3-Sam68重组质粒,阴性对照组转染pcDNA-3空载质粒。应用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测两组Sam68以及EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)mRNA及蛋白的表达,CCK-8法和Transwell小室法分别检测两组细胞的增殖、迁移和侵袭情况。结果:采用质粒转染MCF-7细胞48 h后,实验组Sam68 mRNA和蛋白明显过表达(P值均<0.05),EMT标志物包括E-cadherin、N-cadherin和Vimentin mRNA的表达水平无明显变化(P值均>0.05),E-cadherin蛋白的表达水平则明显下调(P<0.05),同时N-cadherin和Vimentin蛋白的表达水平则明显上调(P值均<0.05)。并且发现肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显增强(P值均<0.05)。结论:过表达Sam68促进乳腺癌MCF-7细胞EMT发生,并可增强细胞的增殖、迁移以及侵袭能力。