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目的:本课题研究兔儿风属中天然产物Ainsliadimer A的抗肿瘤作用效果,并选择作用效果最好的前列腺癌DU145细胞为研究对象,探讨其抗前列腺癌的靶标和作用机制。方法:(1)通过CCK-8实验检测Ainsliadimer A对多种细胞增殖的影响,平板克隆形成实验检测其对DU145细胞克隆形成能力的影响。(2)采用流式细胞术检测Ainsliadimer A对DU145细胞凋亡、周期和线粒体膜电位的影响。(3)采用Western blot实验,检测Ainsliadimer A对DU145细胞内凋亡蛋白cleaved caspase9和cleaved-PARP蛋白表达的影响。(4)采用CMAP数据库以及Molecular Docking技术预测Ainsliadimer A可能作用的靶蛋白。(5)利用Western blot实验验证Ainsliadimer A对靶蛋白相关蛋白通路的影响。(6)运用DARTS和CETSA技术验证Ainsliadimer A与靶蛋白是否有结合作用。结果:(1)CCK-8实验结果表明,Ainsliadimer A能够抑制肝癌细胞、黑色素瘤细胞、乳腺癌细胞、结肠癌细胞、肺癌细胞和前列腺癌细胞的增殖,其中对前列腺癌DU145细胞作用效果最好;平板克隆形成实验结果表明Ainsliadimer A能够浓度依赖性地抑制DU145细胞的克隆形成能力。(2)流式细胞术实验结果表明,Ainsliadimer A能够显著的促进DU145细胞的凋亡,阻滞DU145细胞周期于G2期和S期,明显改变DU145细胞的线粒体膜电位。(3)Western blot实验结果表明,Ainsliadimer A能够显著上调凋亡蛋白cleaved-PARP和cleaved-caspase 9的表达量,且具有明显的浓度依赖性。(4)CMAP和Molecular Docking预测结果表明,Ainsliadimer A靶蛋白可能是HSP90蛋白。(5)Western blot实验结果显示,Ainsliadimer A能够显著下调HSP90客户蛋白IKKβ、p-STAT3和p-AKT蛋白的表达量及上调HSP90抑制标志物HSP70蛋白的表达量。(6)DARTS和CETSA实验结果表明,Ainsliadimer A具有直接结合HSP90蛋白的作用。结论:本实验研究结果表明,Ainsliadimer A具有很好的抗肿瘤作用,能抑制多种肿瘤细胞的增殖,其中对前列腺癌DU145细胞作用效果最好。Ainsliadimer A能够浓度依赖性的促进DU145细胞的凋亡,阻滞细胞周期于G2和S期,影响线粒体膜电位。通过CMAP、Molecular Docking、Western blot、DARTS和CETSA实验,确证Ainsliadimer A能够直接结合HSP90蛋白,并通过抑制HSP90活性从而发挥抗前列腺癌的作用。