【摘 要】
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目的：初步探讨沉默VCP基因对人骨肉瘤细胞系U2OS增殖、迁移的影响。方法：构建靶向VCP基因的重组质粒载体（X135-1-2，X135-2-1，X135-3-1）和阴性对照载体（Negative），测序鉴定；X135-1-2，X135
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目的：初步探讨沉默VCP基因对人骨肉瘤细胞系U2OS增殖、迁移的影响。方法：构建靶向VCP基因的重组质粒载体（X135-1-2，X135-2-1，X135-3-1）和阴性对照载体（Negative），测序鉴定；X135-1-2，X135-2-1，X135-3-1质粒分别转染人骨肉瘤细胞系U2OS，Negative质粒转染为阴性对照，未转染骨肉瘤细胞为空白对照。转染后48小时，RT-PCR检测骨肉瘤细胞内VCP mRNA的表达水平；Western Blot测定VCP的蛋白表达水平；MTT检测U2OS细胞的增殖情况；Transwell migration检测U2OS细胞迁移情况。结果：转染后48小时，与空白对照组和阴性对照组相比，X135-1-2、X135-2-1和X135-3-1质粒转染组VCP mRNA和蛋白的表达水平均明显降低，尤以转染质粒X135-3-1组更为显著[VCP mRNA和蛋白表达抑制效率分别为(81.4±3.0)%、(83.3±6.0)%]；各阳性质粒干扰组细胞的增殖能力均被明显抑制，以质粒X135-3-1转染组更为显著(P<0.05)；各阳性质粒干扰组细胞的迁移能力明显下降，以质粒X135-3-1转染组更为显著(P<0.05)。结论：沉默VCP能有效的抑制人骨肉瘤细胞系U2OS细胞体外增殖和迁移，VCP有望成为骨肉瘤治疗新的分子靶点。
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