腹腔内的微量脱落癌细胞，是导致大肠癌术后局部复发和腹膜播散的重要原因，严重影响了患者的预后。因此，检出并消除腹腔内的脱落癌细胞，有助于改善大肠癌患者的预后。传统的细胞形态学和免疫细胞化学方法由于灵敏度不高，难以准确地检出腹腔中的癌细胞。具有高度敏感性和特异性的巢式—逆转录—多聚酶链反应技术(RT-PCR)虽已用于大肠癌腹腔微转移的研究，但目前仅采用CEA一种标志物。由于肿瘤相关基因的异质性，兼之腹膜种植灶的形成也需要多种基因的参与，因此，仅靠检测一种基因的表达恐难以有效地发现肿瘤患者腹腔中的微量癌细胞。MMP-7属于基质金属蛋白酶家族，能降解细胞外基质并促进肿瘤侵袭，且主要在上皮源性癌细胞表达，不在间质细胞表达。CK-20属于细胞角蛋白家族，但较其他家族成员具有更高的组织特异性：主要局限在胃、肠粘膜上皮，不在腹膜间皮表达。此外，它在胃肠肿瘤转移过程中能始终稳定地表达。本研究通过检测大肠癌患者腹腔游离癌细胞三种肿瘤相关基因的表达，旨在探索联合检测三种标志物能否显著提高检查的敏感性，为临床上诊断大肠癌腹腔微转移寻找一种新的较为可靠的方法。 福建医科大学学位论文研究内容： 分别应用细胞形态学mE染色）和巢式一逆转录一多聚酶链反应技术（检狈三种月瘤相关基因：CEA、MMP－7和 CK－20）研究 52例大肠癌患者（癌灶位于腹膜返折以上）的腹水或腹腔灌洗液。以大肠癌细胞株 （Ll）和 10例大肠癌组织作为阳性对照，以取自非肿瘤患者的 10例腹膜组织和 30例腹水或腹腔灌洗液作为阴性对照，分析三种肿瘤标志物在研究大肠癌思者腹腔微量癌细胞时的敏感性和特异性。结果：1．CEA、）tP－7和 CK－20在大肠癌细胞株（LS－174T）和 10例大肠癌组织均有表达；在作为阴性对照的 10例腹膜组织和 30例腹腔灌洗液中，仅 1例腹腔灌洗液表达CEA mRNA，其余则均未检出。2．在敏感性实验中，CEA RT－PCR、bMP－7 RT－PCR和 CK－20 RT－PCR可检出的癌细胞最低浓度均为10个癌细胞／份样本。3．采用细胞学、CEA、MMP－7、CK－2 0和联合以上三指标对腹腔脱落癌细胞的检出率与大肠癌 Duke℃ 分期及腹腔显性种植呈显著性正相关 p＜0．05）。4．本研究中oA／MA（8．砒；20巧2）和“－20＊队A（6．5％；19；／n）的检出率均较细胞学有显著性提高门．3泳9巧2；p①．05人biP刁 I’I’IRN’A的检出率与细胞学相比虽无显著性提高Q5．0饰 13；。’5） p ＞0．05人 但多检出4例；而且，RT干CR检出的32例标本包含了细胞学呈阳性的9例标本。5．联合三种月瘤标志物（CEA、CK一20和hoP－7），其检出率达61．5％（32／52），较使用任何一种标志物均有显著性增高k狈．05人 二 福建医科大学学位论文结论：l．MMPf和 CK《0与 CEA一样可作为研究大肠癌腹腔微转移的良好标志物。2．联合应用三种标志物（CEA、bIMP—7和 CK－20）的检出率与 Duke＊分期及腹膜显性种植的相关分析提示：随着大肠癌病期的进展，腹腔中出现脱落癌细胞并形成显性转移的概率显著增加。3．联合应用三种标志物（CEA、MMP7和 CK20），对腹腔脱落癌细胞的检出率显著高于使用上述任何单一指标及细胞学检查，有助于在临床上及时发现腹腔微转移并指导术后腹腔化疗的及时实施：