[目的]探讨黄芪菟箭合剂（Huangqi Tujian Decoction,HTD）对高糖诱导的肾小球足细胞的 Ras 相关的 C3 肉毒杆菌毒素底物 1（Ras-related C3 botulinum toxin substratel,RAC1）和盐皮质激素受体（mineralocorticoid receptor,MR）信号通路以及足细胞凋亡相关蛋白的影响。[方法]1、通过使用CytoTox 96细胞毒性试剂盒检测足细胞在裂解后的乳酸脱氢酶（Lactic dehydrogenase,LDH）释放率来筛选各药物作用于足细胞的最佳浓度。2、在各药物的最佳浓度确定以后,将分化好的足细胞随机分为5组,对照组（葡萄糖（glucose,Glu）浓度为5mmo/L）,高糖组（Glu浓度为30mmo/L）,HTD（Glu 浓度为 30mmo/L,HTD 浓度为 0.75mg/mL）,NSC23766 组（Glu 浓度为30mmo/L,NSC23766浓度为1.75uM）以及依普利酮组（Glu浓度为30mo/L,依普利酮浓度为1.25uM）。3、将足细胞在37℃培养箱孵育24h,用倒置相差显微镜分别观察正常组、高糖组以及HTD组足细胞的形态变化。4、在荧光显微镜下用细胞免疫荧光染色法定性观察足细胞上标志蛋白nephrin和胞质紧密粘连蛋白1（Zonula occluden-1,ZO-1）的表达;观察通路相关蛋白RAC1和MR的表达以及观察凋亡相关蛋白核因子κ B（nuclear factor-kappaB,NF-κ B）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cysteinyl aspartate specific proteinase-3,caspase-3）的表达水平。5、Western blotting 定量检测足细胞上 nephrin、ZO-1、RAC1、MR、NF-κ B和caspase-3的蛋白表达水平。[结果]1、LDH法探索不同组药物的最佳浓度用不同浓度的各组药物对足细胞干预24h后检测其LDH释放率得出,黄芪菟箭合剂最佳浓度为0.75mg/mL;MR抑制剂依普利酮最佳浓度为1.25uM;RAC1抑制剂NSC23766最佳浓度为1.75uM。2、高糖和黄芪菟箭合剂对足细胞形态的影响显微镜下可见,未分化的足细胞贴壁良好,足突从胞体伸出,呈梭形或者纺锤形。分化好的足细胞细胞核变大,细胞从纺锤状变为星状。高糖组的足细胞形态在一定程度上发生了改变,细胞界限变粗变黑,部分细胞胞质被破坏,只见细胞核。而黄芪菟箭合剂组的足细胞形态并没有发生明显的变化。3、免疫荧光染色法观察各组足细胞nephrin、ZO-1、RAC1、MR、NF-κB以及caspase-3蛋白的表达:DAPI通道下观察:各组不同蛋白都可见蓝色的细胞核;与正常组相比,高糖组的足细胞标志蛋白nephrin和ZO-1的绿色荧光信号减弱,而通路和凋亡相关蛋白RAC1、MR、NF-κB以及caspase-3的绿色荧光信号表达增强;与高糖组相比,黄芪菟箭合剂组、NSC23766组以及依普利酮组足细胞nephrin和ZO-1的绿色荧光信号增强,而RAC1、MR、NF-κB以及caspase-3的绿色荧光信号表达明显减弱。4、Western blotting 检测各组足细胞 nephrin、ZO-1、RAC1、MR、NF-κ B 以及caspase-3蛋白的表达:与正常组相比,高糖组足细胞nephrin和ZO-1表达均下降（P<0.05）,而RAC1、MR、NF-κB以及caspase-3的表达均增加（P<0.05）;与高糖组相比,黄芪菟箭合剂组、NSC23766组和依普利酮组nephrin和ZO-1表达均升高（P<0.05）,而RAC1、MR、NF-κB以及caspase-3的表达均下降（P<0.05）。[结论]1、高糖刺激可以通过激活RAC1/MR信号通路以及凋亡相关蛋白的水平而引起足细胞的损伤;2、中药黄芪菟箭合剂可以通过抑制RAC1/MR信号通路的激活以及降低足细胞凋亡蛋白的水平,进一步减轻高糖诱导的足细胞损伤。[创新点]首次证明了黄芪菟箭合剂可以通过干预RAC1/MR信号通路的保护足细胞,为探索黄芪菟箭合剂治疗糖尿病肾病的可能机制提供了新靶点和新途径。