铁皮石斛对慢性肾小球肾炎大鼠细胞免疫调节的作用研究

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目的:探讨中草药铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)对慢性肾小球肾炎(Chronic Glomerulonephritis,CGN)大鼠Th1/Th2免疫细胞功能的作用。方法:(1)将SD雄性大鼠随机分为正常组和模型组,模型组按照改良造模法使用用牛血清蛋白进行Ms PGN模型造模,使用柔红霉素进行MCD模型和FSGS模型造模,模型组分为模型对照组及铁皮石斛干预A组(治疗量组)、铁皮石斛干预B组(高剂量组),造模结束后检测提示24小时尿蛋白含量升高,且肾脏病理分别符合系膜增生性肾小球肾炎、微小病变性肾病、局灶节段性肾小球硬化改变则视为造模成功。铁皮石斛治疗量、铁皮石斛高剂量组每日分别予0.1、0.3g/100g铁皮石斛灌胃,正常对照组和模型对照组予等量生理盐水灌胃,连续灌胃8周;(2)观察各组大鼠体质量、胸腺指数、脾脏指数变化;(3)检测各组大鼠血清肌酐、血清尿素氮、白细胞、淋巴细胞数;(4)检测各组大鼠IL-4和IFN-γ水平,CD3+T、CD4+T和CD4+T/CD8+T水平变化。结果:(1)大鼠一般情况:造模成功后大鼠均出现精神萎靡、倦怠等敏捷度减弱的表现,毛发暗淡无光泽,饮食减少等;正常组大鼠则毛发光亮,活泼好动,反应灵敏,饮食进水正常。铁皮石斛干预后,治疗组大鼠状态较前好转,饮食、饮水较前增加;活动较前敏捷,毛发较前有光泽;模型对照组大鼠状态未见明显变化。(2)24小时尿蛋白定量:在对各组24 UPQ进行检测对比后发现,MCD、FSGS、Ms PGN模型造模后皆出现模型组>正常组(P<0.01),铁皮石斛干预后出现干预组<模型组(P<0.01),铁皮石斛干预A、B组未见明显差异(P>0.05)。(3)铁皮石斛对各模型大鼠肾功能影响:与正常对照组相比,FSGS模型、Ms PGN模型的模型对照组血肌酐、血尿素氮值增长(P<0.05),MCD模型、Ms PGN模型的模型对照组肌酐清除率下降(P<0.05);与模型对照组相比,Ms PGN模型的干预A、B组肌酐、肌酐清除率差异显著(P<0.01),FSGS模型组的干预A组肌酐清除率差异有统计学意义(P<0.05),血尿素氮在MCD模型中干预A组、干预B组之间差异有统计学意义(P<0.05),铁皮石斛干预A、B组无明显差异(P>0.05)。(4)铁皮石斛对各模型大鼠免疫器官指数影响:脾脏指数:与模型对照组相比,Ms PGN模型干预组脾脏指数明显增加(P<0.01),而MCD模型、FSGS模型无统计学意义(P>0.05),铁皮石斛干预A、B组对比无统计学意义(P>0.05)。胸腺指数:与模型对照组相比,FSGS模型、Ms PGN模型表现出显著差异(P<0.01);MCD模型差异无统计学意义(P>0.05);铁皮石斛干预A、B组对比无统计学意义(P>0.05)。(5)铁皮石斛对各组大鼠血清中炎症因子水平影响:与正常对照组相比,三类模型的模型对照组均表现出IL-4、IFN-γ下降(P<0.01);与模型对照组相比,三类模型于铁皮石斛干预后IL-4、IFN-γ值上升(P<0.01);在不同剂量铁皮石斛之间,FSGS模型组表现出与铁皮石斛剂量成正相关(P<0.01)。(6)铁皮石斛对模型大鼠全血CD3+T、CD4+T水平和CD4+T/CD8+T比值影响:与正常对照组相比,三类模型的对照组、铁皮石斛干预组大鼠外周血CD3+T、CD4+T水平和CD4+T/CD8+T比值均明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);与模型对照组相比,铁皮石斛干预后的CD3+T、CD4+T明显下降(P<0.01),CD8+T指标明显上升(P<0.01)。在不同剂量铁皮石斛之间,Ms PGN模型CD3+T表现出且与剂量呈正相关(P<0.05),FSGS模型CD4+T表现出且与剂量呈正相关(P<0.05)。结论:(1)通过牛血清蛋白、柔红霉素造模,可成功复制系膜增生性肾小球肾炎、微小病变性肾病、局灶节段性肾小球硬化模型,且出现大量蛋白尿、肾功能损害、免疫力低下、消瘦等理想的肾炎模型;(2)铁皮石斛可以改善CGN大鼠的一般状况,并减少大鼠尿蛋白的排泄量;(3)铁皮石斛可以升高CGN大鼠的免疫器官脏器指数,改善淋巴细胞增值情况;(4)铁皮石斛可以升高CGN大鼠IL-4和IFN-γ含量,提升CD3、CD4、CD4/CD8水平以及降低CD8水平,调节CGN大鼠免疫功能。
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