三氯化铝抑制大鼠成骨细胞功能的BMP/Smad信号转导机制

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:QQ2009sunboy
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以体外培养SD大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(OB)为研究对象,传代培养至第3代,经鉴定后,在培养体系中分别添加终浓度为0 mg/m L(对照组)、0.063 mg/m L(低剂量组)、0.126mg/mL(中剂量组)、0.252 mg/mL(高剂量组)三氯化铝(Al Cl3·6H2O),染铝24 h。采用实时荧光定量PCR检测OB内BMP-2、BMPR-ⅠA、BMPR-Ⅱ、Runx2、Osterix、COL-I、ALP和BGP m RNA表达水平,Western blot检测OB细胞内BMP-2和p-Smad1/5/8、细胞膜上p BMPR-ⅠA及细胞核内Runx2和Osterix蛋白表达水平,免疫共沉淀方法检测OB细胞质及细胞核内Smad1/5/8/4复合物蛋白表达水平。旨在研究铝抑制OB功能的BMP/Smad信号转导机制,结果表明:(1)染铝组OB细胞内BMP-2 m RNA及蛋白表达水平和p-Smad1/5/8蛋白表达水平、BMPR-A和BMPR-m RNA表达水平、细胞膜上p BMPR-A蛋白表达水平及细胞质和细胞核内Smad1/5/8/4复合物蛋白表达水平显著低于CG(p<0.01)。表明铝抑制OB的BMP/Smad信号转导通路。(2)染铝组OB细胞核中Runx2和Osterix m RNA及蛋白表达量显著低于CG(P<0.01)。表明铝抑制OB核转录因子活性。(3)染铝组OB中COL-I、ALP和BGP mRNA表达显著低于CG(P<0.01)。表明铝抑制OB功能。上述结果说明,铝通过抑制OB内BMP/Smad信号转导通路,和下调细胞核内转录因子Runx2和Osterix表达,抑制OB合成细胞外基质COL-I、ALP和BGP的功能。
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