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1.目的和意义支架蛋白Gabs (Grb2-assosiated binders)家族广泛参与了酪氨酸磷酸化修饰,其调控方式主要通过招募、绑定并活化相关酪氨酸磷酸酶等重要下游分子,起到放大相应信号的作用。Gab1是Gabs家族中表达量最高,表达最广泛的一员。目前Gab1在呼吸系统中的在体研究尚无文献报道。预实验中我们发现小鼠肺部炎症模型中Gabs蛋白表达升高,结合不久前Gab1作为支气管哮喘易感基因的报道,我们预测Gab1在炎症性肺疾病中存在调控机制。我们在体外研究中发现,沉默鼠二型肺泡上皮细胞系Gab1转录导致表面活性蛋白(surfactant proteins, SPs)表达下降。二型肺泡上皮(AT-Ⅱ)是肺损伤的主要靶细胞,尽管整个过程中炎症刺激的意义尚不明确,但AT-Ⅱ受损及异常修复可进一步导致肺纤维化的发生。肺纤维化是以肺成纤维细胞增殖及细胞外基质聚集为特征的病变,是严重威胁人类健康的疾病,且确切发病机制尚不清楚,防治手段有限。目前已知肺纤维化发生与纤维化相关基因及群体基因、多种细胞因子的异常表达,以及纤维化相关信号转导途径的激活等有一定关系。Gab1与肺部炎症以及后续炎症修复的关系如何,我们进行了后续研究。2.研究方法利用Cre-loxp系统结合反式tetO激活系统构建了可诱导二型肺泡上皮Gab1定向敲除模型。鉴定小鼠敲除效率后我们观察了小鼠表型,用体积描计箱检测小鼠肺动态顺应性,分析表面活性蛋白表达情况,并从亚细胞层面观察了Gab1缺失对AT-Ⅱ结构的影响。本底敲除Gab1并未引起小鼠肺部炎症改变,我们进一步观察了博来霉素诱导的肺纤维化模型中小鼠表型,在慢性炎症过程中Gab1缺失导致了最终纤维化损伤加重。最后,我们构建了Gab1点突变质粒,进一步讨论Gab1如何通过下游通路影响肺稳态。3.研究结果3.1可诱导二型肺泡上皮Gab1定向敲除小鼠(Gab1△/△)肺泡表面活性蛋白表达下降,AT-Ⅱ板层小体形态异常；3.2Gab1△/Δ在肺纤维化模型后期体重不再增加,纤维化损伤加重；3.3Gab1的缺失阻断多条生长因子参与的肺损伤修复通路；3.4体外过表达Gab1突变质粒引起肺泡表面活性蛋白表达下降。4.结论4.1Gab1通过TTF-1、ABCA3调控肺泡表面活性蛋白的合成,进而影响肺功能；4.2Gab1在肺纤维化损伤中起到保护作用,Gab1缺失导致博来霉素诱导的模型中Gab1△/△纤维化损伤加重；4.3Gab1维持了多条肺损伤修复信号通路；4.4Gab1通过SHP2或PI3K途径调控了肺泡表面活性蛋白表达,维持肺稳态。