不同应力加载方式对成骨细胞线粒体膜电位的影响

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[研究背景及目的] 各类修复体承载基础牙槽骨的退行性改变已成为现阶段影响口腔修复治疗效果的重要因素之一。研究和探讨促进成骨细胞增殖和功能的生物治疗方法是解决上诉问题的唯一途径。线粒体膜电位Δψ与其功能状态密切相关,在细胞不同的分化阶段受到不同调节维持细胞功能。然而现在对于线粒体在成骨细胞受载后的功能变化尚不甚明了。本实验旨在阐明不同加载方式对成骨细胞线粒体Δψ,细胞增殖及分泌功能的影响;分析线粒体功能对力学刺激的响应是否与细胞增殖和分化状态一致。 [实验材料与方法] 本实验使用人类成骨细胞肉瘤来源MG63成骨细胞系,采用调节外环境的胶体渗透压的方法对细胞进行持续的均匀牵张,可以通过改变胶体渗透压和加力时间来研究不同加力方式对成骨细胞线粒体功能的影响。在持续加力0.5h、4h和6h后检测线粒体膜电位改变、细胞增殖指数变化和碱性磷酸酶ALP的表达,每时间点观察4个实验组及1个对照组。线粒体膜电位特异的荧光探针JC-1可以通过激光共聚焦显微镜和流式细胞术定量研究Δψ的变化。使用PI对75%乙醇固定细胞染色,用流式细胞
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