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目的：1.通过构建小鼠信号转导与转录激活因子3β（Signaltransducer and activator of transcriptions3β, Stat3β）基因重组腺病毒表达载体，感染小鼠乳腺癌细胞4T1并表达Stat3β基因，研究竞争性抑制4T1中STAT3信号通路，对小鼠乳腺癌细胞的影响。2.探讨miR17-5p对STAT3基因的调控作用，并通过抑制STAT3信号通路的影响，研究其对MCF-7增殖、凋亡、侵袭迁移能力的影响。方法：1.HindⅢ、XbaⅠ双酶切载体pcDNA-Zeo-Stat3β-C4flag获得目的基因Stat3β，亚克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV，双酶切鉴定成功后经PmeⅠ酶切线性化后转化到含pAdEasy-1的BJ5183菌株中，重组载体经PacⅠ线性化后，在HEK293A细胞中进行包装，感染小鼠乳腺癌细胞，设立PBS对照组、pAdtrack空载对照组；经RT-PCR及WesternBlot检测目的基因Stat3β及STAT3信号通路下游基因c-myc、MMP2、MMP9及p-STAT3的表达情况，流式细胞术（FCM）检测4T1细胞周期及细胞凋亡情况，划痕实验检测4T1细胞的迁移能力，Transwell小室实验检测4T1细胞的侵袭能力。2.利用生物信息学方法检测STAT3mRNA的3’UTR区的在脊椎动物间的保守性，预测调控STAT3基因表达水平的microRNA。选择miR17-5p作为研究对象，构建相应的luciferase载体用双荧光素酶报告系统验证miR17-5p能否直接靶向调节STAT33’UTR区；然后用miR17-5p mimics（microRNA模拟物）转染人乳腺癌细胞株MCF-7，mimics control和过表达STAT3恢复组作为对照，检测miR17-5p是否在转录后水平调控STAT3的表达，以及对STAT3信号通路相关蛋白的影响；通过Transwell系统检测miR17-5p对MCF-7细胞的迁移和侵袭能力的影响；流式细胞术（FCM）检测miR17-5p对MCF-7细胞周期和细胞凋亡的影响。结果：1.重组腺病毒载体构建成功，转染HEK293A细胞进行包装，可观察到GFP表达，测得病毒滴度为1.1×109pfu/ml，将包装成功后的重组腺病毒pAd-Stat3β感染小鼠4T1后，RT-PCR结果显示，处理组明显表达STAT3β，Western Blot结果显示STAT3β可明显下调4T1细胞c-myc、MMP2，MMP9蛋白水平，而对p-STAT3蛋白水平无明显影响。FCM结果显示，重组腺病毒pAd-Stat3β感染4T1细胞后，细胞周期和细胞凋亡情况无明显影响；划痕实验结果显示4T1细胞迁移能力无明显变化；Transwell小室侵袭实验结果表明4T1细胞侵袭能力明显下降。2.生物信息学分析STAT3基因mRNA3’UTR区在人、马、兔等多种脊椎动物间高度保守；相应的luciferase载体构建成功，双荧光素酶报告系统显示miR17-5p能够通过直接靶向于STAT3基因mRNA3’UTR，调控报告基因luciferase的表达水平。人乳腺癌细胞MCF-7转染miR17-5p mimics后，RT-PCR和Western Blot的显示，miR17-5p对STAT3的mRNA无明显影响，但能调控STAT3的蛋白水平，说明miR17-5p于转录后水平调控STAT3基因的表达情况。Western Blot检测STAT3信号通路的相关蛋白，发现miR17-5p能够显著下调p-STAT3、MMP2、c-myc、Bcl2、vimentine的表达水平，显著上调CD31、AnnexinⅡ的表达情况，而对E-cadherin及MMP9的表达无显著影响。Transwell小室实验结果显示，miR17-5p对MCF-7细胞的迁移能力无显著影响，但能降低MCF-7细胞的侵袭能力；FCM结果显示miR17-5p能促进MCF-7细胞凋亡但对其细胞周期无显著影响。结论：1.成功构建重组腺病毒载体pAd-Stat3β，并在4T1细胞中表达目的基因Stat3β;过表达STAT3β后，可以竞争性抑制4T1细胞STAT3信号通路，抑制STAT3信号通路下游基因c-myc、MMP2、MMP9的表达，抑制4T1细胞的侵袭。2. miR17-5p可通过与STAT3基因mRNA的3’UTR区互补结合而于转录后水平调控该基因的表达，通过下调STAT3信号通路的相关蛋白，抑制MCF-7细胞的侵袭并促进其凋亡，并影响肿瘤细胞上皮间质化转变(Epithelial to Meschymal Transition，EMT)某些标志物。