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对乙酰氨基酚(APAP)是一种使用极其广泛的退热止痛药物。目前只知其具有引起肝脏损失的毒性,而其他副作用却知之甚少。为了研究对乙酰氨基酚的毒性,本试验以斑马鱼作为实验动物模型,用三种给药方式对对乙酰氨基酚的毒性进行了研究。为了解对乙酰氨基酚对斑马鱼胚胎的持续毒性,本研究用2 mmol/L、4 mmol/L和8 mmol/L三个不同浓度的对乙酰氨基酚,对发育4h的斑马鱼胚胎进行持续给药,直到96h为止;并在72h和96h两个时间点,观察斑马鱼孵化率、存活率、心囊面积、色素沉着情况。结果发现在斑马鱼胚胎孵化过程中,孵化率和存活率均降低;且在发育过程中,斑马鱼出现心囊浮肿、尾部异常弯曲以及色素沉着减少等现象。通过荧光定量PCR分析,发现给药组斑马鱼的甲状腺素有关基因DIO2、DIO3、THRβ以及TRH的表达与对照组有差异;脂肪酸结合蛋白基因FABP10A、丝裂素活化蛋白激酶P38A、促调亡基因BAX和抑制调亡基因MCL-1B表达都受到影响,说明对乙酰氨基酚持续作用于斑马鱼胚胎,会影响斑马鱼一些基因的表达。为弄清对乙酰氨基酚对斑马鱼胚胎的短期毒性,使用不同浓度的对乙酰氨基酚对发育4h的斑马鱼胚胎进行给药,24h后更换斑马鱼培养液,对斑马鱼进行观察,发现结果与上述持续给药组类似。说明不论是短期作用还是持续作用,对乙酰氨基酚均可破坏色素细胞,影响斑马鱼甲状腺素的分泌,促进斑马鱼肝脏的细胞凋亡。进一步利用对乙酰氨基酚对发育3d的斑马鱼幼鱼进行了毒性实验,结果也证实了对乙酰氨基酚的上述毒性作用。分别对对乙酰氨基酚处理组与对照组的斑马鱼进行转录组测序比较,根据相应转录组数据进行分析,共获得15,198个新基因,其中新的变异体为350,905个,12,303个基因结构被优化。分析了各样品间的差异表达基因。结果发现,对照组(CO组)与试验组(CAPAP组)的差异表达基因数量为72个,其中上调差异表达基因数量为40个,下调差异表达基因数量为32个。相对于CO组,CAPAP组显著性上调表达的基因是BX323060.3、zgc:109934、prdx1(peroxiredoxin 1,过氧化物还原酶1)、ndst1a[N-deacetylase/N-sulfotransferase(heparan glucosaminyl)1a、N-脱乙酰酶/N-磺基转移酶1a(又名葡糖胺酰基肝素葡1a)]、gstp1(glutathione S-transferase pi 1,谷胱甘肽S-转移酶pi 1)、rnf150b(ring finger protein 150b,环指蛋白150b)、fkbp5(FK506 binding protein 5,FK506结合蛋白5)等。其中与肝脏损伤有关的基因主要是prdx1、gstp1、fkbp5、txn、ucp3、tm4sf4、mt-cyb、ddx5、g3bp2、anxa4和try。相对于CO组,CAPAP组显著性下调表达的基因是ndrg1b(N-myc downstream regulated 1b,N-myc下游调节蛋白1b)、SLC38A9(solute carrier family 38 member9,溶质载体家族38成员9)、ela3l(elastase 3 like,类弹性蛋白酶3)、prss59.2(protease,serine,59,tandem duplicate 2,丝氨酸蛋白酶59串联重复2)、opn1mw1(opsin 1 cone pigments medium-wave-sensitive 1,中波敏感锥形色素视蛋白1)、g3bp2(G3BP stress granule assembly factor 2,G3BP应激颗粒组装因子2)、ctsbb(cathepsin B,组织蛋白酶B)等。其中与色素沉着有关的基因是Rho、opn1lw2和opn1mw1。