生物被膜是由蛋白质、DNA和多糖组成的被基质包裹的细菌聚集性结构群落。与浮游生物相比,生物被膜对各种抗生素的耐药性要高出10～1000倍,并且几乎所有的微生物在形成生物被膜后,对绝大多数抗生素具有较强的耐药性。噬菌体裂解酶是噬菌体在感染细菌后期表达的一类细胞壁水解酶,对多种细菌均有杀菌作用且不易产生耐药性,能抑制生物被膜的形成并加以降解清除,使之有望成为新型的抗菌物质。本文以通过宏病毒组测序获得的裂解酶基因P26ly序列为基础,利用PCR扩增方法鉴别出含有此基因的噬菌体株,并研究该噬菌体的生物学特性,同时对裂解酶基因P26ly进行了克隆表达,研究裂解酶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果,并探索其对生物被膜的清除作用。结果表明,裂解酶基因P26ly对应的噬菌体为SP26,该噬菌体属于有尾噬菌体目,长尾噬菌体科,在pH为5～8,温度为4～40℃时活性较高。裂解酶P26ly分子量为17 k Da,最适酶活温度和pH值分别为37℃和7.5,Mg2+、K+离子对酶有激活作用,裂解酶浓度为75μg/mL时能够裂解宿主菌细胞壁,并对多种革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌具有良好的杀菌作用。裂解酶P26ly浓度为75μg/mL时,其分别与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌菌株共孵育后,未形成明显的生物被膜状,菌体分散、密度低,能够有效抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌生物被膜的形成。其分别与已形成生物被膜的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌共孵育后,通过XTT法结合荧光染色观察,可以发现生物被膜中的被膜菌的活菌数显著降低;扫描电镜结果显示,裂解酶P26ly作用后生物被膜的细胞被破坏,引起细胞质内容物溶出,并导致细胞变形。说明裂解酶对生物被膜具有较好的清除作用。进一步将裂解酶P26ly与抗生素阿莫西林联合使用后,发现生物被膜的清除效果更佳,说明两者联用的杀菌效果比单独使用更显著。综上所述,裂解酶P26ly能够有效抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌生物被膜的形成,同时对已经形成的生物被膜有降解作用。裂解酶P26ly与抗生素阿莫西林联用后,能够降低抗生素的使用量。表明裂解酶P26ly有望成为新型的抗菌物质,本研究为抗生素的替代技术提供了一个新的思路。